Investigación con PCR en Tiempo Real e Histopatología sobre la presencia de H. felis, H. heilmannii y H. pylori en Perros

• Gokhan Akcakavak Yozgat Bozok University, Faculty of Veterinary Medicine, Department of Pathology Sorgun, Yosgat, Turkey
• Mehmet Tuzcu Selcuk University, Faculty of Veterinary Medicine, Department of Pathology. Selcuklu, Konya, Turkey
• Nevin Tuzcu Selcuk University, Faculty of Pharmacy, Department of Pharmaceutical Microbiology. Selcuklu, Konya, Turkey
• Zeynep Celik Selcuk University, Faculty of Veterinary Medicine, Department of Pathology. Selcuklu, Konya, Turkey
• Aysenur Tural Selcuk University, Faculty of Veterinary Medicine, Department of Pathology. Selcuklu, Konya, Turkey
• Osman Dagar Selcuk University, Faculty of Veterinary Medicine, Department of Pathology. Selcuklu, Konya, Turkey

DOI: https://doi.org/10.52973/rcfcv-e33214

Palabras clave: Canino, histopatología, Real-Time PCR, H. felis, H. heilmannii, H. pylori

Resumen

Especies de Helicobacter como H. heilmannii, H. pylori, H. felis, H. bizzozeronii y H. salomonis han sido identificadas en gatos y perros, y en los últimos años se han intensificado las investigaciones que sugieren que estas especies pueden ser agentes zoonóticos. El objetivo de este estudio fue por medio de la comparación de los hallazgos histopatológicos y los resultados de PCR en tiempo real, revelar la presencia de H. felis, H. heilmannii y H. pylori en los tejidos del estómago e hígado tomados durante las necropsias de perros con dueño, callejeros o procedentes del refugio. El material del estudio consistió en tejidos de estómago e hígado tomados de 35 perros fallecidos por diferentes causas y que fueron traídos para la realización de la necropsia. Se detectó ADN de H. heilmannii mediante PCR en tiempo real en las muestras de hígado de 30 perros utilizando primers específicos de H. heilmannii. En el caso de las muestras gástricas, la PCR en tiempo real detectó H. heilmannii en 13 casos, H. pylori en 3 casos, tanto H. heilmannii como H. pylori en 13 casos, y H. felis, H. heilmannii y H. pylori en 3 casos. Microscópicamente en el tejido estomacal se observó infiltración de leucocitos neutrófilos, degeneración epitelial, fibrosis y edema en la lámina propia e infiltración de células linfoplasmocitarias. En la tinción de Hematoxilina y Eosina de los cortes, 5 casos resultaron positivos para microorganismos tipo Helicobacter y 14 casos en la tinción Warthin-Starry. Microscópicamente, en el tejido hepático se observó disociación de las columnas de Remark y degeneración hidrópica en los hepatocitos, e infiltraciones de células mononucleares focales en algunas secciones. En conclusión, con este estudio se comprendió que los análisis de PCR en tiempo real son muy útiles en el diagnóstico de H. felis, H. heilmannii y H. pylori. Sin embargo, los exámenes histopatológicos son necesarios para asociar la presencia de dichas bacterias con el desarrollo de la enfermedad.

Citas

AGUILAR, E.; ALVAREZ, M.; VIDAURRE, R.; RIVERA, M.; LEPE-LOPEZ, M.; Trends in the veterinary clinic for pets in guatemala city. Rev. Cientif. FCV-LUZ. XXX(4): 186–191. 2020.

ARMSTRONG, D. Helicobacter pylori infection and dyspepsia. Scand. J. Gastroenterol. Suppl. 31: 38–47. 1996.

ASHAOLU, J.O.; TSAI, Y.J.; LIU, C.C.; JI, D.D. Prevalence, diversity and public health implications of Helicobacter species in pet and stray dogs. One Health. 15: 100430. 2022. https://doi.org/jvnh.

BRUYETTE, D. Clinical Small Animal Internal Medicine, In: Gastritis and Gastric Ulceration in dogs and cats, John Wiley & Sons. Pp. 547–555. 2020.

BURUCOA, C.; AXON, A. Epidemiology of Helicobacter pylori infection. Helicob. 22: e12403. 2017. https://doi.org/gg6dq6.

DİKER, K.S.; HAZIROĞLU, R.; AKAN, M.; ÇELİK, S.; KABAKÇI, N. The prevalence, colonization sites and pathological effects of gastric helicobacters in dogs. Turkish J. Vet. Anim. Sci. 26: 345–351. 2002.

DUNN, B.E. Pathogenic mechanisms of Helicobacter pylori. Gastroenterol. Clin. North Am. 22: 43–57. 1993.

EATON, K.; DEWHIRST, F.; PASTER, B.; TZELLAS, N.; COLEMAN, B.; PAOLA, J.; SHERDING, R. Prevalence and varieties of Helicobacter species in dogs from random sources and pet dogs: animal and public health implications. J. Clin. Microbiol. 34: 3165–3170. 1996.

GERMANI, Y.; DAUGA, C.; DUVAL, P.; HUERRE, M.; LEVY, M.; PIALOUX, G.; SANSONETTI, P.; GRIMONT, P. Strategy for the detection of Helicobacter species by amplification of 16S rRNA genes and identification of H. felis in a human gastric biopsy. Res. Microbiol. 148: 315–326. 1997.

HAESEBROUCK, F.; PASMANS, F.; FLAHOU, B.; CHIERS, K.; BAELE, M.; MEYNS, T.; DECOSTERE, A.; DUCATELLE, R. Gastric helicobacters in domestic animals and nonhuman primates and their significance for human health. Clin. Microbiol. Rev. 22: 202–223. 2009.

HÄNNINEN, M.L.; HAPPONEN, I.; SAARI, S.; JALAVA, K. Culture and characteristics of Helicobacter bizzozeronii, a new canine gastric Helicobacter spp.. Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 46: 160–166. 1996.

HAPPONEN, I.; LINDEN, J.; SAARI, S.; KARJALAINEN, M.; HÄNNINEN, M.L.; JALAVA, K.; WESTERMARCK, E. Detection and effects of helicobacters in healthy dogs and dogs with signs of gastritis. J. Am. Vet. Med. Assoc. 213: 1767–1774. 1998.

HAPPONEN, I.; SAARI, S.; CASTREN, L.; TYNI, O.; HÄNNINEN, M.L.; WESTERMARCK, E. Occurrence and topographical mapping of gastric Helicobacter‐like organisms and their association with histological changes in apparently healthy dogs and cats. J. Vet. Med. 43: 305–315. 1996.

HERMANNS, W.; KREGEL, K.; BREUER, W.; LECHNER, J. Helicobacter-like organisms: histopathological examination of gastric biopsies from dogs and cats. J. Comp. Pathol. 112: 307–318. 1995.

HLAOPERM, C.; CHOOWONGKOMON, K.; PRUKSAKORN, C.; RATTANASRISOMPORN, J. Development of an easy-to-use urease kit for detecting Helicobacter pylori in canine gastric mucosa. Vet. World. 14: 1977. 2021.

HUSNIK, R.; KLIMES, J.; KOVARIKOVA, S.; KOLORZ, M. Helicobacter Species and Their Association with Gastric Pathology in a Cohort of Dogs with Chronic Gastrointestinal Signs. Anim. 12: 1254. 2022.

HWANG, C.Y.; HAN, H.R.; YOUN, H.Y. Prevalence and clinical characterization of gastric Helicobacter species infection of dogs and cats in Korea. J. Vet. Sci. 3: 123–133. 2002.

JALAVA, K.; KAARTINEN, M.; UTRIAINEN, M.; HAPPONEN, I.; HÄNNINEN, M.L. Helicobacter salomonis spp.. nov., a canine gastric Helicobacter spp., related to Helicobacter felis and Helicobacter bizzozeronii. Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 47: 975–982. 1997.

JALAVA, K.; ON, S.L.; VANDAMME, P.A.; HAPPONEN, I.; SUKURA, A.; HÄNNINEN, M.L. Isolation and identification of Helicobacter spp. from canine and feline gastric mucosa. Appl. Environ. Microbiol. 64: 3998–4006. 1998.

KAUSER, F.; HUSSAIN, M.A.; AHMED, I.; SRINIVAS, S.; DEVI, S.M.; MAJEED, A.A.; RAO, K.R.; KHAN, A.A.; SECHI, L.A.; AHMED, N. Comparative genomics of Helicobacter pylori isolates recovered from ulcer disease patients in England. BMC Microbiol. 5: 1–10. 2005.

LADEIRA, M.; SALVADORI, D.; RODRIGUES, M. Biopathology of Helicobacter pylori. J. Bras. Patol. Med. Lab. 39: 335–342. 2003. https://doi.org/dp78t6.

LUNA, L. Manual of histologic staining methods of the Armed Forces Institute of Pathology, In: Routine Staining Procedures. Blakiston Division, McGraw-Hill, New York. 258 pp. 1968.

MURRAY, P.R.; BARON, E.J.; PFALLER, M.A.; TENOVER, F.C.; YOLKEN, R.H.; MORGAN, D.R. Vibrio and realted organism. Manual of Clinical Microbiology. 6rd. Ed. 1482 pp. 1995.

NEIGER, R.; DIETERICH, C.; BURNENS, A.; WALDVOGEL, A.; CORTHÉSY-THEULAZ, I.; HALTER, F.; LAUTERBURG, B.; SCHMASSMANN, A. Detection and prevalence of Helicobacter infection in pet cats. J. Clin. Microbiol. 36: 634–637. 1998.

NEIGER, R.; SIMPSON, K.W. Helicobacter infection in dogs and cats: facts and fiction. J. Vet. Intern. Med. 14: 125–133. 2000.

NEIGER, R.; TSCHUDI, M.E.; BURNENS, A.; GOKE, B.; SCHMASSMANN, A. Diagnosis and identification of gastric Helicobacter species by polymerase chain reaction in dogs. Microb. Ecol. Health Dis. 11: 234–240. 1999.

NORRIS, C.; MARKS, S.L.; EATON, K.; TORABIAN, S.; MUNN, R.; SOLNICK, J.V. Healthy cats are commonly colonized with “Helicobacter heilmannii” that is associated with minimal gastritis. J. Clin. Microbiol. 37: 189–194. 1999.

OKUBO, B.M.; RICCI-AZEVEDO, R.; ZOBIOLE, N.N.; BUCCINI, D.F.; MORENO, S.E. Prevalência de Helicobacter spp. em cães de Campo Grande-MS. Ciên. Anim. Bras. 18: e-17286. 2017. https://doi.org/jvnj.

ONUR, E. İstanbul’da kedi köpek sahiplenmesinin sosyo-ekonomik parametreleri. İstanbul Üniversitesi Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Turkey. Doctoral Thesis. 100 pp. 2012.

OTTO, G.; HAZELL, S.; FOX, J.; HOWLETT, C, MURPHY.; J, O'ROURKE.; J, LEE A. Animal and public health implications of gastric colonization of cats by Helicobacter-like organisms. J. Clin. Microbiol. 32: 1043–1049. 1994.

ÖZEN, H.; KARAMAN, M.; ÖZCAN, K. Detection and prevalence of gastric Helicobacters in dogs: comparasion of may-Grünwald Giemsa, warthin-starry and immunohistochemistry. Vet. 16: 48–56. 2005.

SAĞNAK, S.; ÖZGÜR, N.Y. İstanbul Yöresinde Sağlıklı ve Klinik Belirti Gösteren Köpeklerde Helicobacter pylori Varlığının Kültür, Polimerase Chain Reaction (PCR) ve Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP) ile Saptanması. İstanbul Üniversitesi Sağlik Bilimleri Enstitüsü. Turkey. Doctoral Thesis. 56 pp. 2011.

TABRIZI, A.S.; DERAKHSHANDEH, A.; ESFANDIARI, A.; ATASHI Z.A. Identification of Helicobacter spp. in gastrointestinal tract, pancreas and hepatobiliary system of stray cats. Iran. J. Vet. Res. 16: 374. 2015.

XIA, H.X.; KEANE, C.T.; CHEN, J.; ZHANG, J.; WALSH, E.J.; MORAN, A.P.; HUA, J.S.; MEGRAUD, F.; O'MORAIN C.A. Transportation of Helicobacter pylori cultures by optimal systems. J. Clin. Microbiol. 32: 3075–3077. 1994.

YAMASAKI, K.; SUEMATSU, H.; TAKAHASHI, T. Comparison of gastric lesions in dogs and cats with and without gastric spiral organisms. J. Am. Vet. Med. Assoc. 212: 529–533. 199.