Dot Elisa para el diagnóstico serológico de la anaplasmosis y babesiosis bovina.
Abstract
La detección rápida de anticuerpos contra hemoparásitos de Anaplasma rnarginale, Babesia bovis y B. bigernina fue lograda exitosamente mediante el uso de cuerpos de inclusión de A. rnarginale y merozoitos purificados de B bovls y B. bigernina, en una prueba serodiagnóstico Dot- ELISA. El inmunoensayo enzimático utilizo solamente 20 ng de merozoitos de Babesia spp y 25 ng de antígeno de A. rnarginale aplicado sobre discos de nitrocelulosa. Los complejos antígeno-anticuerpo fueron detectados mediante fosfatasa alcalina conjugada a proteína A y las reacciones fueron leídas visualmente después de la adición de un substrato cromogénico precipitable. La prueba permitió en menos de 3 horas, el procesamiento de múltiples sueros para tamizaje serológico o para determinación de título y fue tan sensible como la prueba de inmunofluorescencia indirecta (IFI). El comportamiento de Dot-ELISA para el diagnóstico serológico de la anaplasmosis y babesiosis bovina fue analizado en 580 y 200 sueros respectivamente y fue como sigue: A. marginalesensibilidad, 93%; especificidad, 96%; y valor predictivo, 95%; B. bovis - sensibilidad, 95%; especificidad, 82%; y valor predictivo, 95%; B. bigemina - sensibilidad, 98%; especificidad. 79%; y valor predictivo, 97%. No se observaron reacciones cruzadas con sueros bovinos positivos a Babesia spp, A. rnarginaie , Trypanosoma vivax o a infecciones virales y bacterianas comunes. El antígeno aplicado en la nitrocelulosa fue estable almacenado a - 20°, 4° o 25° C. Comparado con IFI, Dot-ELISA resultó más fácil, más rápida y con interpretación mas objetiva de los resultados. La simplicidad y bajo costo combinados con alta sensibilidad y especificidad hacen de Dot-ELISA una prueba fácilmente adaptable al trópico donde seria de la mayor utilidad para estudios seroepidemiológicos de la anaplasmosis y babesiosis bovina.