EFECTO in vitro DE Lactobacillus casei Y Lactobacillus acidophilus SOBRE EL CRECIMIENTO DE Salmonella spp. EN YOGURT LÍQUIDO // In vitro EFFECT OF Lactobacillus casei AND Lactobacillus acidophilus ON Salmonella spp. GROWTH IN LIQUID YOGURT

• Omaira Besereni Laboratorio de Prácticas Profesionales de Bacteriología, Escuela de Bioanálisis Facultad de Ciencias de la Salud, Universidad de Carabobo. Venezuela
• Teresita Luigi Laboratorio de Prácticas Profesionales de Bacteriología, Escuela de Bioanálisis Facultad de Ciencias de la Salud, Universidad de Carabobo. Venezuela Centro de Investigaciones de Microbiología Ambiental (CIMA- UC). Departamento de Microbiología, Escuela de Ciencias Biomédicas, Facultad de Ciencias de la Salud, Universidad de Carabobo. Venezuela.
• María Acosta Laboratorio de la Cruz Roja. Valencia, estado Carabobo, Venezuela
• Legna Rojas Escuela de Ciencias Biomédicas y Tecnológicas. Facultad de Ciencias de la Salud, Universidad de Carabobo. Venezuela Centro de Biotecnología Aplicada. Departamento de Biología. Facultad de Ciencias y Tecnología, Universidad de Carabobo. Venezuela

Palabras clave: Lactobacillus, Salmonella, yogurt, probióticos, probiotics

Resumen

RESUMEN

El uso de lactobacilos probióticos como agentes de biopreservación en alimentos es cada vez más conocido ya que producen diferentes agentes antimicrobianos capaces de inhibir el crecimiento de patógenos además de aumentar la vida media del producto. Con el objetivo de evaluar el efecto in vitro de Lactobacillus casei y Lactobacillus acidophilus sobre el crecimiento de Salmonella spp. inoculada artificialmente en yogurt líquido semidescremado, se procedió a confrontar L. acidophilus y L. casei con suspensiones de Salmonella spp. de baja y alta concentración (1x103 y 1x108 UFC/mL, respectivamente) en yogurt líquido como matriz. Las poblaciones de Salmonella spp. inoculadas a baja y alta concentración disminuyeron más (P<0,001) en presencia de la mezcla de lactobacilos que cuando fueron adicionados los probióticos por separado. El pH de las muestras, con y sin probióticos, disminuyó al transcurrir el tiempo en presencia del inóculo de Salmonella spp., mientras que el recuento de los lactobacilos durante el almacenamiento fue ligeramente mayor (P< 0,02) cuando ambos probióticos se encontraban juntos que cuando se encontraban por separado. La incorporación de las mezclas de probióticos L. casei y L. acidophylus en el yogurt líquido semidescremado favorece la total inhibición del crecimiento de bacterias gastrointestinales como Salmonella spp. El presente trabajo constituye un aporte importante para promover en la industria láctea nacional, la adición de estos microorganismos probióticos, los cuales no sólo confieren mayor valor agregado al alimento, sino que preservan y aseguran la inocuidad del mismo, repercutiendo en un menor riesgo de enfermedades transmitidas por alimentos gastrointestinales.

 

ABSTRACT

 The use of probiotic lactobacilli as biopreservation agents in foods is increasingly known as they produce different antimicrobial agents capable of inhibiting the growth of pathogens as well as increasing the half-life of the product. The aim of this study was to evaluate the in vitro effect of Lactobacillus casei and Lactobacillus acidophilus on Salmonella spp. growth in semi-skimmed liquid yogurt. L. acidophilus and L. casei strains were artificially inoculated with bacterial suspensions of Salmonella spp. at low and high concentration (1x103 and 1x108 CFU/mL, respectively). Populations of Salmonella spp. inoculated at low and high concentration decreased earlier in the presence of the mixture of lactobacilli than when the probiotics were added separately (P<0.001). The pH of the samples with and without probiotics decreased through the time in the presence of Salmonella spp. inoculum, while the lactobacillus count during storage was slightly higher when both probiotics were added together than when they were incorporated separately (P< 0.02). The incorporation of probiotic mixtures L. casei and L. acidophylus in the semi-fat liquid yogurt favors the total inhibition of the growth of gastrointestinal bacteria such as Salmonella spp. The present research is an important contribution to promote in the national dairy industry the addition of these probiotic microorganisms, not only concedes more added value to the food, but also preserves and ensures the safety of it, having a lower risk of gastrointestinal diseases.

Citas

ABDEL-DAIM, A.; HASSOUNA, N.; HAFEZ, M.; ASHOR, M.S.A.; ABOULWAFA, M.M. Antagonistic activity of Lactobacillus isolates against Salmonella typhi in vitro. Biomed. Res. Int. 5 (31): 1-11. 2013

ABREU, E. D.; ZENI, J.; STEFFENS, C.; STEFFENS, J. Frozen yogurt from sheep milk. Rev. Ceres. 63(5): 605-613. 2016.

AMERICAN PUBLIC HEALTH ASSOCIATION (APHA). Standard Methods for the Examination of Water and Wasterwater. 18 Ed. Washington, D.C. Pp 919-927. 1992.

BORTOLUZZI, M.; NUNES, C.R.Z.; SILVA, M.L.; KALSCHNE, D.L.; MENDONÇA, S.N.T.G.; BRANDÃO, W. Microbiological, physicochemical and sensory characterization of commercial yogurt with plum pulp. Rev. Bras. Pesq. Alim. 5(1): 9-18. 2014.

CAMPANA, R.; VAN HEMERT, S.; BAFFONE, W. Strain-specific probiotic properties of lactic acid bacteria and their interference with human intestinal pathogens invasion. Gut. Pathog. 9(1): 1-12. 2017.

CARTER, A.; ADAMS, M.; LA RAGIONE, R.M.; WOODWARD, M.J. Colonisation of poultry by Salmonella Enteritidis S1400 is reduced by combined administration of Lactobacillus salivarius 59 and Enterococcus faecium PXN- 33. Vet. Microbiol. 199: 100-107. 2017.

CIRONE, K.; HUBERMAN, Y.; MORSELLA, C.M.; MÉNDEZ, L.; JORGE, M.; PAOLICCHI, F. Growth of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis, Escherichia coli, and Salmonella Enteritidis during Preparation and Storage of Yogurt. ISRN. Microbiol. 2013: 1-7. 2013.

COMISIÓN VENEZOLANA DE NORMAS INDUSTRIALES (COVENIN). Norma N° 902: 78. ALIMENTOS. Métodos para el recuento de microorganismos aeróbios en placas Petri. Comisión Venezolana de Normas Industriales. Fondonorma. Venezuela. 1978.

COMISIÓN VENEZOLANA DE NORMAS INDUSTRIALES (COVENIN). Norma Nº 1315-79. Determinación de pH (acidez iónica). Comisión Venezolana de Normas Industriales. Fondonorma. Venezuela. 1979.

COMISIÓN VENEZOLANA DE NORMAS INDUSTRIALES (COVENIN). Norma N° 1086: 84. Métodos para Recuento de Bacterias Coliformes en Placas de Petri. Comisión Venezolana de Normas Industriales. Fondonorma. Venezuela. 1984.

COMISIÓN VENEZOLANA DE NORMAS INDUSTRIALES (COVENIN). Norma Nº: 1291: 88. Alimentos. Aislamiento e identificación de Salmonella. Comisión Venezolana de Normas Industriales. Fondonorma. Venezuela. 1988.

COMISIÓN VENEZOLANA DE NORMAS INDUSTRIALES (COVENIN). Norma N° 1337: 90. Método para recuento de hongos y levaduras. Comisión Venezolana de Normas Industriales. Fondonorma. Venezuela. 1990.

COMISIÓN VENEZOLANA DE NORMAS INDUSTRIALES (COVENIN). Norma Nº 3006-93. Recuento de Lactobacillus Bulgaricus y Streptococcus Thermophilus”. Comisión Venezolana de Normas Industriales. Fondonorma. Venezuela. 1993.

COMISIÓN VENEZOLANA DE NORMAS INDUSTRIALES (COVENIN). Norma Nº 2393: 2001. Yogurt. Comisión Venezolana de Normas Industriales. Fondonorma. Venezuela. 2001.

DE OLIVEIRA, FM.; LYRA, I.N.; ESTEVES, G.S.G. Avaliação microbiológica e físico-química de iogurtes de Morango industrializados e comercializados no municipio de Linhares- Es. Rev. Bras. Prod. Agroind. 15(2): 147-155. 2013.

EL-SAYED, E.M.; EL-ZEINI, H.M.; HAFEZ, S.A.; SALEH, F.A. Antibacterial Activity of Probiotic Yoghurt and Soy- Yoghurt against Escherichia coli and Staphylococcus aureus. J. Nutr. Food. Sci. 4(303): 1-6. 2014.

ELLNER, R. Cultivos Iniciadores. En: Preguntas y respuestas sobre la microbiología de la leche y los productos lácteos. Díaz de Santos, Ed. Madrid (España). 52pp. 2000.

GEMECHU, T. Review on lactic acid bacteria function in milk fermentation and preservation. Afr. J. Food. Sci. 9(4): 170- 175. 2015.

KILIC, G. The Effects of Probiotic Cultures in Functional Foods: Technological Aspects of Probiotics. In: Microbial Cultures and Enzymes in Dairy Technology. IGI Global. Pp. 101-121. 2018.

LEBEER, S.; BRON, P.A.; MARCO, M.L.; VAN PIJKEREN, J.P.; MOTHERWAY, M.O.C.; HILL, C.; KLAENHAMMER, T. Identification of probiotic effector molecules: present state and future perspectives. Curr. Opin. Biotechnol. 49: 217- 223. 2018.

MALIK, M.A.; KOTWAL, S.K.; RASHID, M.; SHARMA, H.K.; SINGH, M.; SHARMA, N. Growth Dynamics of Salmonella, Isolated from Different Sources, at different Temperature and pH. J. Anim. Res. 5(1): 85-93. 2015.

MILTON, J.S. Regresión y correlación. En: Estadística para biología y ciencias de la salud. 3ra Ed. McGraw-Hill Interamericana Madrid. Pp 407– 428. 2001.

MISHRA, V.; SHAH, C.; MOKASHE, N.; CHAVAN, R.; YADAV, H.; PRAJAPATI, J. Probiotics as potential antioxidants: a systematic review. J. Agric. Food. Chem. 63(14): 3615- 3626. 2015.

MOREIRA, I.D.S.; CASTRO, D.S.D.; FEITOA, M.K.D.S.B.; NUNES, J.S.; SANTOS, F.M.D. Elaboração e avaliação da qualidade de iogurtes de maçã adoçados com sacarose e com mel. Rev. Verde. Agroecol. Desenvolv. Sustent. 9(1): 10-14. 2014.

PAKDAMAN, M.N.; UDANI, J. K..; MOLINA, J.P.; SHAHANI, M. The effects of the DDS-1 strain of lactobacillus on symptomatic relief for lactose intolerance-a randomized, double-blind, placebo-controlled, crossover clinical trial. Nutr. J. 15(56): 1-11. 2016.

POTOČNJAK, M.; PUŠIĆ, P.; FRECE, J.; ABRAM, M.; JANKOVIĆ, T.; GOBIN, I. Three new Lactobacillus plantarum strains in the probiotic toolbox against gut pathogen Salmonella enterica serotype Typhimurium. Food. Technol. Biotech. 55(1): 48-54. 2017.

REIS, J.A.; PAULA, A.T.; CASAROTTI, S.N.; PENNA, A.L.B. Lactic acid bacteria antimicrobial compounds: characteristics and applications. Food. Eng. Rev. 4(2): 124-140. 2012.

SILVA, B.C.; SANDES, S.H.C.; ALVIM, L.B.; BOMFIM, M.R.Q.; NICOLI, J.R.; NEUMANN, E.; NUNES, A.C. Selection of a candidate probiotic strain of Pediococcus pentosaceus from the faecal microbiota of horses by in vitro testing and health claims in a mouse model of Salmonella infection. J. Appl. Microbiol. 122(1): 225-238. 2017

TAMHANE, A. C. 18 Multiple comparisons. Handbook of statistics.13: 587-630. 1996.

TARMAN, A.A.; RAMLI, N.N.; RIDLA, M.R.M.; YAMAN, M.A.; SETIYONO, A.A. Effects of organic acids on Salmonella enteritidis growth inhibition and ileum surface area in laying ducks fed anaerobically fermented feed. Poult. Sci. 16(3): 98-104. 2017.

TELLEZ, G.; PIXLEY, C.; WOLFENDEN, R.E.; LAYTON, S.L.; HARGIS, B.M. Probiotics direct fed microbials for Salmonella control in poultry. Food. Res. Int. 45(2): 628- 633. 2012.

TSIRAKI, M.; YEHIA, H.; ELOBEID, T.; OSAILI, T.; SAKKAS, H.; SAVVAIDIS, I. Viability of and Escherichia coli O157: H7 and Listeria monocytogenes in a delicatessen appetizer (yogurt-based) salad as affected by citrus extract (Citrox©) and storage temperature. Food. Microbiol. 69:11-17. 2018.

VISAUTA, V.B. Análisis Estadístico con SPSS 11.0 para Windows. Estadística Básica. Vol 1. McGraw-Hill. España. 331pp. 2002.

VÉNICA, C.I.; BERGAMINI, CV.; ZALAZAR, C.A.; PEROTTI, M.C. Effect of Lactose Hydrolysis during Manufacture and Storage of Drinkable Yogurt. J. Food. Nutr. Disor. 2 (5):1-7. 2013.

ZAPATA, I.C.; SEPÚLVEDA-VALENCIA, U.; ROJANO, B.A. Efecto del Tiempo de Almacenamiento sobre las Propiedades Fisicoquímicas, Probióticas y Antioxidantes de Yogurt Saborizado con Mortiño (Vaccinium meridionale Sw). Inform. Tecnol. 26(2): 17-28. 2015.