Invest Clin 59(4): 325 - 338, 2018 https://doi.org/10.22209/IC.v59n4a04

Expresión de p53 y Bcl-2 en carcinoma ductal infiltrante de mama localmente avanzado. Su relación con el subtipo intrínseco molecular como factor pronóstico.

Liliana Castillo1, Félix Bonilla2, Aldo Reigosa3 y Ángel Fernández3,4

1. Instituto de Oncología Dr. Miguel Pérez Carreño. Valencia, Venezuela.

2. Hospital Universitario Puerta de Hierro Majadahonda. Madrid, España.

3. Centro de Investigaciones Médicas y Biotecnológicas de la Universidad de Carabobo. Facultad de Ciencias de la Salud. Universidad de Carabobo. Valencia, Venezuela.

4. Departamento de Ciencias Fisiológicas. Escuela de Ciencias Biomédicas

y Tecnológicas. Facultad de Ciencias de la Salud. Universidad de Carabobo. Valencia, Venezuela.

Palabras clave: cáncer de mama; subtipo molecular; p53; Bcl-2.

Resumen. En el cáncer de mama existen factores pronósticos y predicti- vos que pueden afectar la evolución de las mujeres con esta enfermedad. Por tal motivo, el presente estudio tiene como objetivo determinar la expresión inmunohistoquímica (IHQ), de las proteínas p53 y Bcl-2 en el tumor primario de 285 mujeres, con diagnóstico de carcinoma ductal infiltrante de mama, en seguimiento en el Instituto de Oncología Dr. Miguel Pérez Carreño de Valencia, Venezuela. La inmunoexpresión de ambas proteínas se relacionó con los subti- pos intrínsecos moleculares del cáncer de mama definidos por IHQ: Luminal A, Luminal B, HER2 y Triple Negativo (TN), la supervivencia libre de enfermedad (SLE) y la supervivencia global (SG). Los tumores p53 negativo y Bcl-2 positivo mostraron una mayor SLE y SG. En los tumores p53 negativo del subtipo Lumi- nal A hubo una mayor SLE (p=0,005), aunque en los tumores Luminales (A y B), la SG fue mayor (p<0,05). Además, se presentó una mayor SLE en los casos Luminales y TN con expresión positiva de Bcl-2, pero sin significancia estadísti- ca. Por el contrario, hubo un efecto pronóstico significativo de la expresión de Bcl-2 en el subtipo TN, con SG media menor en comparación con la SG obte- nida en los tumores con Bcl-2 positivo. Finalmente, en función de los hallazgos encontrados se concluye que la ausencia de expresión p53 y la expresión positi- va de Bcl-2 son factores de buen pronóstico, con significancia estadística en los tumores Luminales y TN, respectivamente.

Autor de correspondencia: Ángel Fernández. Departamento de Ciencias Fisiológicas. Escuela de Ciencias Biomédi- cas y Tecnológicas. Facultad de Ciencias de la Salud. Universidad de Carabobo. Valencia, Venezuela. Teléfono: +58- 0241-8666243. Correo electrónico: aafernandez@uc.edu.ve.

Expression of p53 and Bcl-2 in locally advanced infiltrating ductal carcinoma of the breast. Its relationship with the intrinsic molecular subtype as a prognostic factor.

Invest Clin 2018; 59 (4): 325 - 338

Key words: breast cancer; molecular subtype; p53; Bcl-2.

Abstract. In breast cancer there are prognostic and predictive factors that can affect the evolution of women with breast cancer. For this reason, the pres- ent study aims to determine the immunohistochemical expression (IHC) of p53 and Bcl-2 proteins in the primary tumor of 285 women with a diagnosis of in- filtrating ductal carcinoma of the breast under follow-up at the Dr. Miguel On- cology Institute. Pérez Carreño from Valencia, Venezuela. The immunoexpres- sion of both proteins was related to the molecular intrinsic subtypes of breast cancer defined by IHC: Luminal A, Luminal B, HER2 and Triple Negative (TN), disease free survival (SLE) and overall survival (OS). The tumors p53 negative and Bcl-2 positive showed a higher SLE and SG. In the p53 negative tumors of the Luminal A subtype there was a higher SLE (p = 0.005), although in the Luminal tumors (A and B) the OS was higher with p <0.05. In addition, greater SLE was presented in Luminal and TN cases with positive Bcl-2 expression, but without statistical significance. On the contrary, there was a significant prog- nostic effect of the expression of Bcl-2 in the TN subtype, with a lower mean SG compared to the SG obtained in tumors with positive Bcl-2. Finally, based on the findings found, the absence of p53 expression and the positive expression of Bcl-2 are good prognostic factors, with statistical significance in Luminal and TN tumors, respectively.

Recibido 17-05-2018 Aceptado 28-11-2018

INTRODUCCIÓN

El cáncer de mama constituye un pro- blema de salud pública a nivel mundial y representa el tipo de cáncer más frecuente en el sexo femenino. En el año 2015 fueron diagnosticadas 1,7 millones de mujeres; me- dio millón de ellas murieron a causa de esta enfermedad, siendo más de la mitad de los casos diagnosticados en los países desarrolla- dos: 370.000 casos al año en Europa (27,4%) y 230.000 en Norteamérica (31,3%) (1,2).

La Organización Panamericana de la Salud, en su publicación más reciente, indi- ca que para el año 2012, 408.000 mujeres fueron diagnosticadas con cáncer de mama

en Latinoamérica, de las cuales 92.000 fa- llecieron a causa de esta enfermedad (3). En Venezuela, el Anuario de Mortalidad del Ministerio del Poder Popular para la Salud, demostró que el carcinoma mamario es la principal causa de muerte por cáncer en mu- jeres, con un registro de 2060 casos durante el año 2013 y para el 2017 las proyecciones de la Sociedad Anticancerosa de Venezuela, estimaron 26.500 muertes como consecuen- cia del cáncer, con un aproximado de 53.000 casos nuevos (4).

La heterogeneidad del carcinoma de mama es un hecho bien reconocido y acep- tado, que puede explicarse por su origen de células madre cancerosas con potencia-

les evolutivos diferentes y un significativo número de alteraciones genéticas posibles, esto gracias a los estudios a nivel genómi- co, transcriptómico y proteómico (5,6). Nu- merosos trabajos han confirmado la utilidad de los subtipos moleculares por su capaci- dad de predecir la evolución y la respuesta a diferentes tratamientos en el cáncer de mama, lo que ha contribuido a la medicina personalizada. Sin embargo, estos subtipos no son grupos homogéneos, ya que existen grupos híbridos o subtipos con importancia pronóstica y terapéutica que pueden definir- se mediante la inmunohistoquímica (IHQ). Actualmente, desde el punto de vista IHQ, se reconocen los subtipos intrínsecos mole- culares Luminal A, Luminal B, HER2 y Triple Negativo (TN) (7-9).

Utilizando la IHQ se han definidos fac- tores pronósticos y predictivos, que pueden afectar la evolución del cáncer de mama, en- tre los que se incluyen las proteínas p53 y Bcl-2 (10,11). La p53 es un factor de trans- cripción nuclear que se une al ácido desoxi- rribonucleico (ADN), para regular la trans- cripción de determinados genes, jugando un papel en el control del ciclo celular a través de la detección de la célula en la fase G1, G2 o M, la iniciación de la reparación del ADN o la activación de la muerte celular por apop- tosis. Esta respuesta se pierde ante el gen inactivado por mutación, el cual produce una proteína defectuosa que ejerce un efec- to contrario, provocando la multiplicación de células genómicante alteradas y el creci- miento tumoral, por lo que se considera un factor de mal pronóstico en los diferentes subtipos moleculares (12-14).

Por su parte, la proteína Bcl-2 tiene una función anti-apoptótica e inhibe la muerte celular, lo que resulta en la supervivencia ce- lular prolongada. Se expresa con frecuencia en el epitelio mamario normal y está regula- da positivamente por el estrógeno (15,16). Asimismo, ha demostrado ser un predictor independiente de pronóstico favorable, aun- que con resultados inconsistentes en diferen- tes estudios, en relación con los subtipos in-

trínsecos moleculares y por ello sigue siendo controversial sobre todo en los tumores TN (receptores hormonales y HER2 negativos), donde ha mostrado resultados contradicto- rios en diferentes publicaciones (17,18).

Por tales razones, esta investigación tiene como objetivo general, determinar a través de la IHQ, el perfil de inmunoexpre- sión de las proteínas p53 y Bcl-2 en el tumor primario, relacionando su expresión con los subtipos intrínsecos moleculares del car- cinoma de mama, la supervivencia libre de enfermedad (SLE) y la supervivencia global (SG) de las pacientes evaluadas, consideran- do que una mejor caracterización inmunofe- notípica de los tumores, permitirá avanzar en el establecimiento de diferentes catego- rías con distinto pronóstico y con ello, un abordaje terapéutico más efectivo.

PACIENTES Y MÉTODOS

El presente estudio se realizó en pa- cientes diagnosticadas con carcinoma duc- tal infiltrante de mama, en seguimiento en el Instituto de Oncología Dr. Miguel Pérez Carreño (IOMPC) de Valencia, Venezuela. Se determinó la expresión inmunohistoquímica (IHQ) de p53 y Bcl-2 y se compararon los resultados obtenidos con la supervivencia li- bre de enfermedad (SLE), la supervivencia global (SG) y los subtipos intrínsecos defi- nidos por IHQ, de acuerdo a la expresión del receptor de estrógeno (RE), del receptor de progesterona (RP) y del receptor del factor de crecimiento epidérmico 2 (HER2).

La SLE en meses, se definió como el tiempo transcurrido desde el tratamiento radical (cirugía o radioterapia), hasta la fe- cha de la recaída bien sea local o a distancia (en caso de haber ocurrido). Por su parte, la SG en meses se consideró como el tiempo transcurrido desde el diagnóstico, hasta la fecha de la muerte, atribuida o no al cáncer de mama. Se realizó el seguimiento clínico hasta 165 meses y el tiempo de superviven- cia, en caso de haber ocurrido la muerte an- tes de los 60 meses.

Sujetos del estudio. Las pacientes en esta investigación fueron diagnosticadas con cáncer de mama en el IOMPC entre los años 2005 y 2012, con un seguimiento hasta 2017. Con la aprobación del Comité de Ética y de la Comisión de Investigación del IOMPC, se con- formó una serie no aleatoria, de tipo inten- cional, con 285 mujeres, de acuerdo a los si- guientes criterios de inclusión: a) diagnóstico de carcinoma ductal infiltrante de mama sin otra especificación, o mixto, con componen- te ductal predominante, b) resultados previos de los niveles de expresión IHQ del RE, RP y HER2 y c) disponibilidad de las preparaciones histológicas y bloques de parafina respectivos correspondientes al diagnóstico inicial.

Inmunohistoquímica. Las muestras ti- sulares se fijaron en formol y se incluyeron en parafina siguiendo los métodos conven- cionales en el Servicio de Anatomía Patoló- gica del IOMPC. De los bloques de parafina se obtuvieron secciones histológicas de 4 μm de espesor, que fueron recogidas en láminas portaobjetos tratadas previamente con poly- L -lisina, para evitar el desprendimiento de los cortes. Posteriormente, los cortes fueron trasladados al Centro de Investigaciones Mé- dicas y Biotecnológicas de la Universidad de Carabobo (CIMBUC), en donde se procedió a realizar la técnica de la IHQ.

Luego de la desparafinación e hidrata- ción de las muestras, la recuperación anti- génica se realizó en el Isotemp Water Bath (modelo Isotemp 205, Fisher Scientific®. Es- tados Unidos) con un tampón Tris-EDTA (10 mM Tris-Base, 1 mM EDTA, 0,05% Tween 20, pH 9,0, Dako. Estados Unidos) a 95°C. Se- guidamente, los cortes se lavaron en tampón Tris-HCl (50 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl, 0,05% Tween 20, pH 7,6, Dako. Estados Uni- dos) a temperatura ambiente. El bloqueo de la peroxidasa endógena se realizó con peróxido de hidrógeno al 3% en metanol. Consecutivamente, se realizó la incubación con el anticuerpo primario (p53, clon D07, dilución 1:100 y Bcl-2, clon 124, dilución 1:40, ambos marca Dako, Estados Unidos), de acuerdo al protocolo indicado por la casa

comercial. Las muestras se lavaron en tam- pón Tris-HCl y se añadió el anticuerpo se- cundario estreptavidina-biotina-peroxidasa (Envision, Dako, Estados Unidos). Finalmen- te, la inmunotinción se reveló mediante la aplicación del cromógeno diaminobencidina (0,05% tetrahidrocloruro de diaminobenci- dina, 50 mM Tris-HCl, pH 7,4). El montaje de los cortes se efectuó con resina sintéti- ca (DPX), para su visualización posterior en el microscopio (marca Zeiss Axiostar Plus, Estados Unidos). En la valoración de la ex- presión de ambas proteínas, se consideró un resultado positivo cuando existía >10% de inmunoexpresión y se refirió como el resul- tado negativo, cuando había expresión en el 10% o menos de las células tumorales.

Análisis estadístico. El análisis de los datos recogidos se realizó mediante el pa- quete estadístico SPSS (Statistical Package for Social Sciences, versión 22). Los resulta- dos se expresaron como media y desviación estándar en el caso de variables cuantitativas y como número absoluto y porcentaje en las cualitativas. La asociación entre las variables clínico-patológicas, subtipos intrínsecos mo- leculares y marcador inmunohistoquímico se analizó con la prueba de Chi cuadrado y el test exacto de Fisher. El estudio de supervi- vencia se realizó mediante el método de Ka- plan-Meier. Se consideraron significativos los valores de p<0,05.

RESULTADOS

La edad media de las pacientes en el momento del diagnóstico fue de 51,6 años. El estadio clínico más frecuente fue el III e histológicamente los tumores en su mayoría fueron moderadamente diferenciados. El se- guimiento de las pacientes de la serie osciló entre 5 y 165 meses. La media para la SLE se ubicó en 70,4 ± 41,4 meses y la SG media fue mayor con 87,8 ± 38,2 meses. Más del 30% de las pacientes fallecieron durante el tiempo de seguimiento. Los principales datos clínico- patológicos de las pacientes incluidas en este estudio se detallan en la Tabla I.

TABLA I

CARACTERÍSTICAS CLÍNICO-PATOLÓGICAS DE LA SERIE

Variable

Edad (años): media (rango) --- 51,6 (26-86) n (%)

Grupos etarios (edad en años)

≤40 53 (18,6)

41-50 94 (33,0)

51-60 75 (26,3)

≥61 63 (22,1)

Estadio clínico I ---

II 104 (36,5)

III 168 (58,9)

IV 13 (4,6)

Grado histológico I 53 (18,6)

II 161 (56,5)

III 71 (24,9)

Subtipos intrínsecos moleculares Luminal A 70 (24,6)

Luminal B 116 (40,7)

HER2 21 (7,4)

Triple Negativo 78 (27,3)

Supervivencia libre de enfermedad

(media en meses ± DE) --- 70,4 ± 41,4

Supervivencia global

(media en meses ± DE) --- 87,8 ± 38,2

La ausencia de expresión de la proteína p53 predominó en los subtipos Luminales y HER2, no obstante, en el subtipo TN más del 50% expresó la proteína p53 (p<0,05). Asi- mismo, el 68,6% de los tumores Luminal A expresó la proteína Bcl-2, aunque el 53,4% del subtipo Luminal B era Bcl-2 negativo. En los tumores HER2 y TN, predominaron los casos Bcl-2 negativo (p<0,05) (Tabla II).

Los tumores p53 negativo, mostraron un menor índice de recaída de la enfermedad, con una media de SLE de 94,4 ± 4,2 meses compa- rados con 82,2 ± 5,3 meses obtenidos en los

casos p53 positivo (p<0,05). De igual forma, se obtuvo una mayor SG media de 122,6 ± 4,1 meses en los casos p53 negativo versus la SG de 113,9 ± 5,6 meses alcanzada en los tumores p53 positivo (p=0,035) (Fig. 1). En relación al Bcl-2, la expresión positiva de Bcl-2 influyó en la SLE, al obtener una media de 100,8 ± 5,5 meses a diferencia de los casos Bcl-2 negati- vo, en donde la SLE fue de 79,8 ± 5,6 meses (p<0,05). De igual forma, su expresión se aso- ció a una SG media de 140,2 ± 5,1 a diferencia de la SG de 102,3 ± 5,6 meses obtenida en los tumores Bcl-2 negativo (p<0,05) (Fig. 2).

TABLA II

EXPRESIÓN DE LAS PROTEÍNAS P53 Y BCL -2 Y SU ASOCIACIÓN CON LOS SUBTIPOS INTRÍNSECOS MOLECULARES DEL CARCINOMA DE MAMA

n (%)

Marcador Expresión p*

p53 Negativo Positivo

Bcl-2 Negativo

0,004

<0,001

Positivo 48 (68,6) 54 (46,6) 7 (33,3) 21 (26,9)

TN= Triple Negativo. p*= Prueba de Chi2.

Fig. 1. Supervivencia libre de enfermedad (SLE, A) y supervivencia global (SG, B) media en la expresión de la proteína P53 determinada mediante inmunohistoquímica.

Fig. 2. Supervivencia libre de enfermedad (SLE, A) y supervivencia global (SG, B) media en la expresión de la proteína BCL -2 determinada mediante inmunohistoquímica.

En el análisis de supervivencia de los subtipos intrínsecos de acuerdo a la expre- sión de p53 mediante IHQ, se obtuvo que en los tumores Luminal A hubo una mayor SLE de las pacientes con expresión negativa de p53, con una media de 107,7 ± 6,2 me- ses contra 78,2 ± 11,2 meses de los casos p53 positivo (p=0,005). Aunque se observó un comportamiento similar en los subtipos Luminal B y HER2, dichos hallazgos no al- canzaron la significancia estadística. Por el contrario, en los tumores TN, la recidiva se presentó más tardía en los casos p53 positi- vo, con una media de 88,4 ± 9,0 meses en

comparación a los 75,4 ± 9,6 meses de los subtipos TN con p53 negativo, sin diferencia estadística significativa (Fig. 3).

Por otra parte, se evidenció una mayor SLE en las pacientes con tumores Luminales y TN, con expresión positiva de Bcl-2, aun- que sin significancia estadística. Comporta- miento contrario se obtuvo en los subtipos HER2, en donde la SLE disminuyó al hacerse negativo el p53 en las células tumorales, sin embargo, el bajo número de casos con estos tumores en la serie, limitó el significado del hallazgo (Fig. 4).

Fig. 3. Supervivencia MEDIA libre de enfermedad en los subtipos INTRÍNSECOS moleculares según la expre- sión de la proteína p53 determinada mediante inmunohistoquímica.

Fig. 4. Supervivencia media libre de enfermedad en los subtipos intrínsecos moleculares según la expresión de la proteína BCL -2 determinada mediante inmunohistoquímica.

Del mismo modo, se obtuvo una mayor SG en las pacientes con ausencia de expresión de p53 en relación a las mujeres cuyos tumores expresaron p53 y pertenecían a los subtipos in- trínsecos moleculares Luminal A y Luminal B, con valor de p≤0,01, respectivamente. No se encontró significancia estadística entre la SG y los subtipos HER2 y TN (Fig. 5).

Asimismo, hubo un efecto pronóstico significativo de la expresión de Bcl-2 en el subtipo TN, con SG media significativamen-

te menor (83 ± 9,2 meses), en comparación con la SG (131,4 ± 6,2 meses) obtenida en los tumores TN con Bcl-2 positivo, con p<0,05. Esta tendencia se observó en los otros subtipos intrínsecos, pero sin signifi- cancia estadística (Fig. 6).

Finalmente, las Figuras 7 y 8 muestran ejemplos representativos de los patrones de expresión inmunohistoquimica observados en los marcadores analizados en este estu- dio.

Fig. 5. Supervivencia GLOBAL media en los subtipos INTRÍNSECOS moleculares según la expresión de la proteína p53 determinada mediante inmunohistoquímica.

Fig. 6. Supervivencia GLOBAL media en los subtipos INTRÍNSECOS moleculares intrínsecos según la expre- sión de la proteína BCL -2 determinada mediante inmunohistoquímica.

Fig. 7. Imágenes de inmuno-expresión de Bcl-2. A) Reacción negativa. B) Expresión en pocas células aisladas.

C) Marcaje en la casi totalidad de las células. D) Expresión en el 100% de las células neoplásicas. Aumento original de 200X.

Fig. 8. Imágenes de inmuno-expresión de p53. A) Reacción negativa. B) Expresión en el 20% de las células. C) Marcaje en el 60% de las células. D) Expresión en el 95% de las células neoplásicas. Aumento original de 200X.

DISCUSIÓN

Las características clínico-patológicas de la serie de pacientes con diagnóstico de cáncer de mama estudiada, tales como la edad, grado histológico y estadio clínico, fueron comparables con lo encontrado en el trabajo de Reigosa y col. (22). En relación a la clasificación molecular del carcinoma de mama, llama la atención que el Luminal B, resultó ser el más frecuente, lo cual di- fiere con otros trabajos que han reportado que el Luminal A es el que predomina sobre los otros subtipos (11,22,23). En la serie, la mayor frecuencia de casos correspondió a tumores HER2, comparable a lo publicado en los otros estudios (11,23). En cuanto a los casos TN, la frecuencia fue bastante ma- yor que en mujeres caucásicas, en quienes la media es de 16%, pero comparable con las cifras referidas a mujeres afroamericanas e hispánicas (11,22,23). En este estudio no se indagó expresamente la raza de las pacien- tes, sin embargo, las mujeres que acuden al IOMPC, son en su gran mayoría de bajos re- cursos económicos y de raza predominante- mente mestiza o hispana.

Los subtipos intrínsecos moleculares mostraron curvas de supervivencia simila- res a las descritas en la gran mayoría de las publicaciones (10,22). Cabe destacar, que el Luminal A presentó el mejor pronóstico con respecto a los otros subtipos, pero sin sig- nificancia estadística. El Luminal B mostró una supervivencia intermedia y los subtipos HER2 y TN, fueron los de peor pronóstico.

Se encontró una asociación estadísti- camente significativa entre la inmunoexpre- sión de p53 y los subtipos intrínsecos mo- leculares, específicamente se evidenció que en los tumores Luminal A, predominaron los casos p53 negativo, lo cual se relacionó con una mayor SLE y SG y por ende con un buen pronóstico; por el contrario, en el TN predo- minaron los tumores p53 positivo con SLE y SG menor, asociándose a un mal pronóstico, hallazgos que coinciden con los resultados de otros trabajos publicados (13,16,17,23).

En este trabajo, la frecuencia de la ex- presión IHQ de Bcl-2 difirió entre los sub- tipos intrínsecos moleculares del carcinoma de mama. Estos hallazgos contrastan con los encontrados por Seong y col. (24), quiénes informaron que en 1304 pacientes con cán- cer de mama la expresión de Bcl-2 fue del 54,4%. Por subtipos, reportaron que el Bcl-2 se expresó en el 74% de los pacientes con Luminal A, 11% Luminal B, 3% HER2 y 13% en pacientes con cáncer de mama TN.

Por otra parte, también se evidenció que la expresión de Bcl-2 tiene un efecto pronóstico según los subtipos intrínsecos redefinidos en el Consenso Internacional de Expertos, St. Gallen 2015 (25). La expresión de Bcl-2 fue un marcador de buen pronóstico en función a la SG en todos los subtipos in- trínsecos moleculares, con significancia es- tadística sólo en el subtipo TN, aunque con SG media significativamente menor en com- paración de la SG obtenida en los tumores Luminal A con Bcl-2 positivo, lo que parece reflejar el efecto indirecto de los recepto- res de hormonas expresados en este último subtipo de cáncer de mama (26,27). Estos hallazgos están en consonancia con otros estudios (24-26), los cuales informaron que los tumores Luminal A con alta expresión de Bcl-2 tienen mejor evolución en compara- ción a los otros subtipos de cáncer de mama.

Aunque no hubo una relación significa- tiva, en nuestro estudio las pacientes con tu- mores Luminal B y sobreexpresión de Bcl-2 tuvieron un mejor pronóstico. A pesar que este subtipo expresa un alto nivel de Ki-67, la expresión de Bcl-2 parece jugar un papel anti-proliferativo que conlleva un resultado clínico favorable en comparación con el cán- cer de mama con expresión Bcl-2 negativa. Por otra parte, una baja frecuencia de ex- presión de Bcl-2, se detectó en los tumores HER2, lo que fue consistente con los hallaz- gos de otros estudios (24,26,27).

Nuestro resultado muestra que en el subtipo TN, la ausencia de expresión de Bcl- 2 tiende a asociarse a un peor efecto pronós- tico. Este resultado no concuerda con otros

estudios que informaron que la baja expre- sión de Bcl-2, está asociada con buenos re- sultados en TN y que sugirieren que una alta tasa de expresión de Bcl-2, es un importante predictor independiente de peor pronóstico en pacientes con cáncer de mama TN (24- 27). En consonancia con los hallazgos de este trabajo, en el estudio de Dawson y col.

(28) concluyeron que la expresión de Bcl-2, está relacionada con una mejor superviven- cia global en todos los subtipos de cáncer de mama, incluido el TN. De igual forma, Ab- del-Fatah y col. (29), mostraron que la baja expresión de Bcl-2 resultó en una evolución pobre en pacientes con TN.

En resumen y aunque el papel de Bcl-2 en TN permanece controvertido, la mayoría de los estudios han concluido que la ausencia de expresión en pacientes con receptores hor- monales negativos o triple negativos se asocia con un mal pronóstico, lo que sugiere que la naturaleza anti-apoptótica de Bcl-2 se exhibe claramente en tales condiciones (29-31).

Finalmente, en función de los hallazgos encontrados, se concluye que la ausencia de expresión p53 y la expresión positiva de Bcl- 2, son factores de buen pronóstico, con sig- nificancia estadística en los tumores Lumi- nales y TN, respectivamente. Se espera que investigaciones adicionales en la población de mujeres venezolanas, puedan respaldar aún más los resultados de este estudio, al verificar el mecanismo de acción por el cual la expresión de p53 y Bcl-2 influye en el pro- nóstico de los subtipos intrínsecos molecula- res del carcinoma de mama.

AGRADECIMIENTOS

A todo el personal técnico y médico que labora en el Servicio de Oncología Médica, Anatomía Patológica e Historias Médicas del Instituto de Oncología Dr. Miguel Pérez Ca- rreño y del Centro de Investigaciones Médi- cas y Biotecnológicas de la Universidad de Carabobo.

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