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______________________________________________________ Revista Cientíca, FCV-LUZ / Vol. XXXIII, Supl. Esp., 240 - 278, 2023
E󰀨ect of partial oocyte maturation before ovum
pick up on developmental competence of bu󰀨a-
lo oocytes
Amjad Riaz1, Muhammad K. Ashraf1, Talha Ashraf1,
Ali Husnain1, Muhammad Yaseen1,
Muhammad H. Mushtaq2, Burhan E. Azam3
1 Department of Theriogenology.
2Department of Epidemiology & Public Health,
University of Veterinary and Animal Sciences, Lahore,
Pakistan.
3Livestock Experimental Station Bhunikey, Buffalo Research
Institute, Pattoki, Pakistan
*Corresponding author: Amjad Riaz (dramjadriaz@uvas.edu.pk)
ABSTRACT
Compared with in vivo matured oocytes, in vitro matura-
tion produces half the number of blastocysts in cattle. We hy-
pothesized that partial maturation of oocytes in vivo improves
blastocyst formation in bu󰀨alo. Therefore, we aimed to inves-
tigate the e󰀨ect of partial in vivo maturation on in vitro embryo
production (IVEP). The estrous cycle of bu󰀨alo was synchro-
nized by double shot prostaglandin (PGF2α, Fatro, Ozzano
Emilia, Italy) with 11-day intervals. On the last PGF2α, dom-
inant follicle ablation and supplementation of progesterone
by inserting intra-vaginal controlled internal drug release was
performed to synchronize the follicle wave emergence and
considered as Day 0 of the experiment. Starting on Day 2 of
the experiment, the ovaries of bu󰀨alo were super-stimulated
with six equally divided doses of 33.3 mg per dose of por-
cine follicle stimulating hormone (Vetoquinol, Magny-Vernois,
France) i.m., for three days with 12 h interval. The experiment
was randomized, with a complete block design. On Day 5 of
the experiment, bu󰀨aloes were blocked by parity, and within
the block, they were assigned randomly to receive 1500 IU of
human chorionic gonadotropin i.m., (hCG, LG Chem, Seoul,
South Korea; n = 6) or to remain untreated control (CON; n
= 4). Oocytes were aspirated six hours after treatment im-
plementations using ultrasound-guided Ovum Pick Up (OPU).
The data was analyzed by using mixed e󰀨ect models in SAS
statistical software. Treatment with hCG did not a󰀨ect the
number of small, medium, and large follicles at the time of
OPU. However, hCG treatment increased (p< 0.01) cleaved
oocytes compared with CON (84.0 vs. 40.5 ± 7.2%). Similar-
ly, oocytes treated with hCG had greater (p = 0.04) develop-
ment from cultured oocytes to Day 7 embryo (52.5 vs. 18.1 ±
10.3%). Treatment with hCG did not a󰀨ect the development of
cleaved oocytes to Day 7 embryo. In conclusion, our results
indicated that partial oocyte maturation improved the in vitro
embryo production. However, the impact was pronounced at
Efecto de la maduración parcial de los ovocitos an-
tes coleccionar los óvulos sobre la competencia del
desarrollo de los ovocitos de búfala
Amjad Riaz1, Muhammad K. Ashraf1, Talha Ashraf1,
Ali Husnain1, Muhammad Yaseen1,
Muhammad H. Mushtaq2, Burhan E. Azam3
1 Departamento de Teriogenología
2 Departamento de Epidemiología y Salud Pública,
Universidad de Ciencias Veterinarias y Animales, Lahore,
Pakistán,
3 Estación Experimental Ganadera Bhunikey, Instituto de
Investigación de Buffalo, Pattoki, Pakistán
*Autor de correspondencia: Amjad Riaz (dramjadriaz@uvas.edu.pk)
RESUMEN
En comparación con los ovocitos madurados in vivo, la
maduración in vitro produce la mitad de los blastocistos en el
ganado. Nuestra hipótesis es que la maduración parcial de los
ovocitos in vivo mejora la formación de blastocistos en búfa-
las. Por lo tanto, nuestro objetivo fue investigar el efecto de
la maduración parcial in vivo en la producción de embriones
in vitro (PIVE). El ciclo estral de las búfalas se sincronizó me-
diante doble inyección de prostaglandinas (PGF2α, Fatro, Oz-
zano Emilia, Italia) con intervalos de 11 días. En la última dosis
de PGF2α, se realizó la ablación del folículo dominante y la
suplementación de progesterona mediante la inserción intra-
vaginal de un dispositivo de liberación interna controlada del
fármaco para sincronizar la aparición de la onda del folículo y
se consideró como el día 0 del experimento. A partir del día 2
del experimento, los ovarios de las búfalas fueron superesti-
mulados con seis dosis divididas equitativamente de 33,3 mg
por dosis de hormona folículo estimulante (FSH) porcina (Veto-
quinol, Magny-Vernois, Francia) por vía intramuscular, durante
tres días con un intervalo de 12 h. El experimento fue aleatorio,
con un diseño de bloques completos. El día 5 del experimento,
las búfalas fueron bloqueadas por paridad y, dentro del blo-
que, fueron asignadas aleatoriamente para recibir 1500 UI de
gonadotropina coriónica humana por vía intramuscular (hCG,
LG Chem, Seúl, Corea del Sur; n=6), o permanecer control
no tratado (CON; n=4). Los ovocitos se aspiraron seis horas
después de la implementación del tratamiento mediante Ovum
Pick Up (OPU) guiada por ultrasonido. Los datos se analizaron
utilizando modelos de efectos mixtos en el software estadístico
SAS. El tratamiento con hCG no afectó la cantidad de folículos
pequeños, medianos y grandes en el momento de la OPU. Sin
embargo, el tratamiento con hCG aumentó (p<0,01) los ovoci-
tos escindidos en comparación con CON (84,0 frente a 40,5 ±
7,2%). De manera similar, los ovocitos tratados con hCG tuvie-
ron un mayor desarrollo (p=0,04) desde los ovocitos cultivados
R-237 Rev. Cientif. FCV-LUZ, XXXIII, SE, 275-276, 2023, https://doi.org/10.52973/rcfcv-wbc120
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13th World Bu󰀨alo Congress ~ 13er Congreso Mundial de Búfalos / Posters / Reproduction _______________________________________
the cleavage rate rather than in the later stages of embryo
development.
Keywords: bu󰀨alo, ovum pick up, in vivo maturation, hCG,
cleavage.
hasta el embrión del día 7 (52,5 frente a 18,1 ± 10,3%). El
tratamiento con hCG no afectó el desarrollo de los ovocitos
escindidos hasta el embrión del día 7. En conclusión, nuestros
resultados indicaron que la maduración parcial de los ovocitos
mejoró la producción de embriones in vitro. Sin embargo, el
impacto fue pronunciado en la tasa de escisión más que en las
últimas etapas del desarrollo embrionario.
Palabras clave: búfala, recogida de óvulos, maduración in
vivo, hCG, escisión.