Detección de anticuerpos contra VDVB en Ecuador / Aguilar-Gálvez y cols.________________________________________________________
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INTRODUCCIÓN
La diarrea viral bovina (DVB) es una enfermedad infecciosa causada
por el virus de DVB (VDVB). Este virus es miembro del género Pestivirus
ubicado dentro de la familia Flaviviridae, Dentro del género Pestivirus
destaca la especie reconocida como virus de la diarrea viral bovina1
(VDVB – 1), virus de la diarrea viral bovina 2 (VDVB – 2), enfermedad
de la frontera (por sus siglas en inglés, BDV) y el virus de la peste
porcina clásica (por sus siglas en inglés, CSFV), y se han propuesto
varias especies nuevas, como ‘’Pestevirus jirafa–1’’, ‘’Pestivirus
antílope berrendo – tivirus”, “virus Bungowannah” y virus “ Hobi–like”
[1]. Según su tropismo, estos virus infectan a cerdos y rumiantes,
incluidos bovinos, ovinos, caprinos y rumiantes salvajes, y pueden
transmitirse por contacto con secreciones infectadas, como orina,
heces o partículas respiratorias [2]. El VDVB es considerado uno
de los agentes infecciosos más importantes del ganado bovino [3,
4]. La DVB es una enfermedad de evolución crónica, a la cual se le
atribuye pérdidas económicas signicativas en la industria ganadera
a nivel mundial, principalmente ocasionadas como consecuencia de
fallas reproductivas [5, 6]. Esta enfermedad tiene una distribución
mundial y tiende a ser endémica en la mayoría de las ganaderías
bovinas, donde se ha estimado un nivel de seropositividad del 40 al
80 % [3, 6]. Estudios en regiones cercanas a Ecuador han demostrado
frecuencias variadas de la presencia de anticuerpos a diarrea viral
bovina, que van desde mayores al 80 % [7, 8], así como frecuencias
menores al 20 %, como las reportadas en Perú [9].
La infección con el VDVB se asocia con una amplia gama de
manifestaciones que pueden ir de subclínicas hasta clínicas en el
ganado. Inicialmente, fue reconocido como el agente causal de
una enfermedad gastrointestinal, ahora se sabe que el virus infecta
casi todos los órganos; con particular tropismo en los sistemas
inmunológico y reproductivo [10]. Las presentaciones van desde
enfermedad respiratoria, trastornos gastrointestinales, síndromes
hemorrágicos y problemas reproductivos como la reabsorción
embrionaria, aborto, infertilidad, muerte fetal, malformaciones
congénitas, momificación y como resultado de una infección
transplacentaria en el primer trimestre de gestación, el nacimiento
de terneros débiles o persistentemente infectados (PI), [4, 11, 12]. Los
animales PI se caracterizan por ser inmunológicamente tolerantes y
representan una importante fuente de infección y mayor reservorio
del virus dada su constante eliminación a través de la saliva, secreción
nasal, orina y heces, durante toda la vida del animal. Es por ello que,
los animales PI constituyen la vía de diseminación más frecuente de
la DVB [7, 10, 13]. En conjunto, todas estas particularidades dicultan
la prevención y el control de la enfermedad.
Se han descrito dos biotipos del VDVB, no citopáticos (NCP) o
citopáticos (CP) según su efecto sobre las células cultivadas. El
biotipo NCP es la principal causa de las infecciones por VDVB. Se
ha demostrado de manera confiable que este biotipo en vacas
gestantes atraviesa la barrera transplacentaria invadiendo al feto.
Cuando esto ocurre durante los primeros 125 días de gestación,
se desarrolla una infección persistente en el feto debido a que el
sistema inmunológico fetal es inmaduro. La circulación viral en el
feto durante el mismo periodo de diferenciación de los linfocitosT
conlleva a que los antígenos virales sean reconocidos como
propios, generando inmunotolerancia y viremia persistente sin
inmunoconversión. Desarrollándose la infección persistente dado
que el sistema inmunitario adaptativo fallaría en el reconocimiento
del virus [14, 15]. Según estudios in vitro, el biotipo NCP, es capaz
de evadir la respuesta inmunitaria innata inhibiendo la capacidad
de producción de interferón tipo 1 (IFN–1) por parte del sistema
inmunitario del hospedador. Esta propiedad del virus es crucial para
una propagación exitosa. Sin embargo, hay estudios in vivo en los que
se ha detectado la producción de IFN–1 en infecciones agudas [15, 16,
17]. La respuesta antiviral fetal afecta la respuesta inmunitaria de la
madre pudiéndose detectar biomarcadores en sangre que facilitarían
la identicación de vacas gestantes de animales PI [15]. Si la infección
fetal ocurre a partir del tercer trimestre de gestación, se desarrolla
una infección transitoria ya que el feto será inmunocompetente y
capaz de desarrollar una respuesta antiviral, pero de igual forma se
podrían generar abortos, nacimiento de crías débiles o crías sanas,
pero en ambos casos seropositivos [17].
Los ensayos realizados para la determinación de anticuerpos por
medio de pruebas de inmunoadsorción ligadas a enzimas (ELISA), se
utilizan comúnmente para la vigilancia de la DVB a nivel de tanques
de leche, en vista de la facilidad que tiene esta técnica para analizar
un número amplio de muestras [7]. La presencia de anticuerpos
en la leche se relaciona con la seropositividad de vacas lactantes
para VDVB en el rebaño [18, 19]. El kit CIVTEST® BOVIS BVD/BD
P80 (NS3) detecta la presencia de anticuerpos contra la proteína
p80, como su nombre lo indica. La misma corresponde a la región
genómica de la proteína no estructural 3 (NS3), de un tamaño de 2049
nucleótidos de largo que codica un total de 680 aminoácidos [20].
Es importante tener en cuenta que la administración de vacunas no
da lugar a niveles signicativamente mayores de anticuerpos p80,
por lo que la interferencia es mínima con las pruebas en tanques de
leche para detectar anticuerpos contra VDVB, haciendo compatible
con los programas de vigilancia [21]. Sin embargo, se debe tener en
consideración que la concentración de virus o anticuerpos en los
tanques de almacenamiento de leche es menor a la concentración
en el suero sanguíneo [22]. Esta adaptación de la técnica de ELISA
constituye una alternativa económica y conable para monitorear la
evolución de los programas de control de este grupo de enfermedades,
en vista de obtenerse información sobre el estado de un grupo de
animales en una sola muestra. El presente estudio tuvo como objetivo
determinar el estado actual de la circulación del virus de la diarrea
viral bovina en tanques de leche a nivel de pequeños establos en la
Provincia de El Oro (Sur del Ecuador).
MATERIALES Y MÉTODOS
Área y población de estudio
El presente trabajo se realizó en un total de 34 tanques de leche
fresca (n = 34), provenientes de 13 ganaderías de los 4 cantones
(Guabo, Santa Rosa, Chilla y Machala) más representativos en
producción lechera en la Provincia de El Oro (Ecuador). Un total
de 306 animales fueron muestreados, con un estimado entre 8 a
10 animales por tanque, y entre 2 a 3 tanques por ganadería. En su
mayoría los animales que aportaron leche al tanque en el día de la
colección, tenían entre 1 a 3 partos, con una media de 7 a 10 litros
por vaca, y ninguno de los animales presentó registro o historia de
vacunación para DVB en la zona. Las 13 ganaderías seleccionadas
para este estudio representan el 14,77 % del total de ganaderías de
la zona con una población superior a 50 animales. En la entrevista
realizada con los ganaderos, todos los hatos seleccionados para el
estudio presentaron sistemas de producción cerrados con medianos
niveles de tecnicación y escasos programas de vacunación, así como
limitadas o nulas asesorías técnicas profesionales.