https://doi.org/10.52973/rcfcv-e34364
Recibido: 11/12/2023 Aceptado: 26/02/2024 Publicado: 03/06/2024
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Revista Científica, FCV-LUZ / Vol. XXXIV, rcfcv-e34364
RESUMEN
La otitis externa es una inamación del conducto auditivo externo, que
afecta generalmente a los caninos, sus causas pueden ser múltiples.
El objetivo de la presente investigación fue determinar el perl de
susceptibilidad bacteriana en cepas de Staphylococcus spp. presentes
en caninos con afectación de otitis externa. La metodología empleada
inicialmente fue la identicación de caninos afectados, tomando en
cuenta sus signos y síntomas (dolor a la palpación, eritema, edema,
hipersecreción, prurito, edema), posteriormente de cada uno se
tomó una muestra de la secreción auricular de un oído usando un
hisopo estéril, los cuales fueron sembrados en agar base con 5 % de
sangre desbrinada de oveja, e incubados a 37°C por 24 horas. Como
resultados obtuvimos que de las 46 muestras colectadas de pacientes
con historial de otitis externa se logró aislar un 65,21 % de cepas de
Staphylococcus spp. Respecto al perl de sensibilidad y resistencia
las cepas aisladas en este estudio mostraron mayor sensibilidad a la
Gentamicina (100 %), seguida de Doxicilina (96,67 %) y Cefoxitina (90 %).
Dentro de los antimicrobianos que presentaron mayor resistencia
in vitro fueron la Eritromicina (26.66 %), seguida de la Clindamicina
(23,33 %) y la Levofloxacina (23,33 %). Considerando el grado de
resistencia a familias de antibióticos, las Lincosamidas (23,33 %),
Macrólidos (21,66 %), Fluoroquinolonas (16,66 %), desarrollaron mayor
resistencia in vitro. El cultivo y antibiograma se convierte en una
herramienta fundamental para un éxito en la terapia antimicrobiana
y evitar así el desarrollo de cepas multirresistentes.
Palabras clave: Staphylococcus spp.; resistencia bacteriana;
antibióticos; microbiota del oído; otitis
ABSTRACT
External otitis is an inammation of the external auditory canal, which
generally affects canines, its causes can be multiple. The objective
of this research was to determine the bacterial susceptibility prole
in Staphylococcus spp. strains, present in canines affected by otitis
externa. The methodology initially used was the identication of
affected canines, taking into account their signs and symptoms
(pain on palpation, erythema, edema, hypersecretion, pruritus,
edema), then a sample of atrial secretion from one ear was taken
from each one using a sterile swab, which were seeded on agar
base with 5% debrinated sheep blood, and incubated at 37°C for
24 hours. As results we obtained that of the 46 samples collected
from patients with a history of external otitis, it was possible to
isolate 65.21% of Staphylococcus spp. Regarding the sensitivity and
resistance prole, the strains isolated in this study showed greater
sensitivity to Gentamicin (100%), followed by Doxycillin (96.67%)
and Cefoxitin (90%). Among the antimicrobials that presented the
highest resistance in vitro were Erythromycin (26.66%), followed
by Clindamycin (23.33%) and Levooxacin (23.33). Considering the
degree of resistance to families of antibiotics, Lincosamides (23.33%),
Macrolides (21.66%), Fluoroquinolones (16.66%) developed greater
resistance in vitro. Culture and antibiogram become a fundamental
tool for successful antimicrobial therapy and avoid the development
of multiresistant strains.
Key words: Staphylococcus spp.; bacterial resistance; antibiotics;
ear microbiota; otitis
Perl de susceptibilidad bacteriana en cepas de Staphylococcus spp.
aislados de caninos con otitis externa
Bacterial susceptibility prole in Staphylococcus spp. strains isolated from canines
with otitis externa
Robert Gustavo Sánchez–Prado
1,2
* , Joseline Paola Santo–Endara
1
, Raquel Estefania Sánchez–Prado
2
, Samantha Guzmán–Pucha
1
,
Fernando Lenin Aguilar–Gálvez
1
, Lorena Elizabeth Chalco–Torres
1
, Dioselina Esmeralda Pimbosa–Ortiz
1
, Jhonny Edgar Pérez–Rodriguez
1
1
Universidad Técnica de Machala. Machala, El Oro, Ecuador.
2
Universidade Federal Do Pará, Programa de Pós–Graduação em Saúde Animal na Amazônia. Castanhal, Brasil.
*Autor para correspondencia: rgsanchez@utmachala.edu.ec
Otitis externa en canino por Staphylococcus spp. / Sánchez-Prado y cols.__________________________________________________________
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INTRODUCCIÓN
La otitis externa es la inamación de conducto auditivo externo,
que tiene una etiología multifactorial, ocurre en varias especies
animales, aunque mayoritariamente es frecuente en caninos (Canis
lupus familairis) [1, 2, 3].
Factores primarios, predisponentes y perpetuantes son causas
de las otitis bacterianas. La presencia de ácaros, atopia canina y
cuerpos extraños son las principales causas que desarrollan otitis
bacterianas. Tipo de orejas pendulosas, conductos auditivo estrecho,
hiperplasia de epidermis, exceso de pelos son considerados factores
predisponentes [4, 5].
Los Staphylococcus spp., hacen parte de la microbiota normal
del canal auditivo de los caninos [6], no obstante, factores como la
temperatura y humedad del canal auditivo puede sufrir modicaciones
permitiendo que la proliferación descontrolada de los microrganismos
comensales del oído desarrollando así un factor perpetuante [7].
Las bacterias del género Staphylococcus son microorganismos
cocos Gram positivos, no esporulan, inmóviles, productores de una
enzima llamada catalasa, y carecen de la producción de oxidasa.
Muchos de estos microorganismos se encuentran colonizando
mucosas de humanos y animales [8, 9]. Los Staphylococcus son
uno de los gérmenes más aislados de la microbiota del oído [10].
El empleo de cultivos y antibiogramas en el campo de la medicina
veterinaria no es una práctica de rutina, por lo que cuando hay
la presentación de una otitis se usan drogas antimicrobianas de
forma aleatoria siendo solo las recidivas sometidas a pruebas de
sensibilidad [11].
El tratamiento de las otitis no es una tarea simple, y el uso
indiscriminado de antibióticos de manera empírica ha incrementado
el nivel de resistencia antimicrobiana siendo la principal causa
del fracaso terapéutico, convirtiendo de esta manera el cultivo y
antibiograma en el éxito del tratamiento y para evitar el aparecimiento
de cepas multirresistentes [12, 13, 7].
Los estudios sobre resistencia y sensibilidad microbiana en oídos
de caninos son variados sin embargo en el Ecuador especícamente
en la región sur las investigaciones aún son incipientes. Siendo el
objetivo de este trabajo delinear el perl de susceptibilidad bacteriana
en cepas de Staphylococcus spp., aislados de perros con otitis externa
del cantón Santa Rosa, Ecuador.
MATERIALES Y MÉTODOS
La colecta de muestras fue realizada a partir de 46 muestras de
hisopados del canal auditivo externo recolectadas de caninos con
historial de otitis externa y sin empleo terapia antibacteriana en el
cantón Santa Rosa, Ecuador.
El diagnóstico de las otitis se realizó identicando la presencia de
más de un síntoma clínico compatibles con la patología estudiada como
es dolor a la palpación, eritema, edema, hipersecreción, prurito, edema.
De cada animal se tomó una muestra de la secreción auricular de
un oído con el auxilio de un hisopo estéril mantenidos en medio Stuart
a 4°C hasta su procesamiento en el Laboratorio de Microbiología de
la Universidad Técnica de Machala.
Los hisopados óticos fueron sembrados en agar base con 5 %
de sangre desfibrinada de oveja, cultivados en una incubadora
microbiológica (marca Becktron, modelo BKI–45L, India), a 37°C
por 24 horas (h). Para la caracterización morfológica de las bacterias
se ejecutó tinción Gram.
Posteriormente se realizó un repique de una colonia aislada a
un agar no selectivo (Agar Nutriente), para efectuar las pruebas
bioquímicas catalasa, oxidasa y antibiograma [10].
Para ejecutar la diferenciación de bacterias del género Micrococcus
de los Staphylococcus se ejecutó el test de oxidasa y la prueba de
la sensibilidad a la bacitracina (Disco de 0,04 UI) [10]. Luego de la
identicación de los microorganismos como Staphylococcus spp., las
cepas bacterianas se diluyeron a una turbidez de 1,5 × 10
8
Macfarland,
para luego ejecutar el test de susceptibilidad y resistencia antimicrobiana
por el método de Kirby–Bauer en Agar Mueller Hinton [14], acorde a las
recomendaciones del Clinical and Laboratory Standards Institute [15].
Los antibióticos fueron seleccionados en función del grupo de
antibióticos que pertenecen y de la recomendación del CLSI 2022,
que incluyen Grupo A Macrólidos: Azitromicina (15ug), Eritromicina
(15 ug), Sulfas: Trimethoprim–sulfamethoxazole (5 ug)., Lincosamidas:
Clindamicina (2 ug). Grupo B: Tetraciclinas como Minociclina (30 ug),
Doxicilina (30 ug), Tetraciclina (30 ug). GrupoC Fluoroquinolonas:
Ciprofloxacina (5 ug), Moxifloxacina (5 ug), Levofloxacino (5 ug), y
Aminoglucósidos como la Gentamicina (10 ug). Para la detección fenotípica
de la meticilino resistencia se empleó el disco de Cefoxitina (30 ug) [15].
RESULTADOS Y DISCUSION
Luego de las 24 h de siembra se obtuvieron colonias de 3 mm de
diámetro en promedio, la tinción Gram revela bacterias cocoides,
positivas. La prueba de catalasa positiva permitió diferenciar de
Streptococcus y Enterococcus y la prueba de oxidasa negativa y la
resistencia al disco de Bacitracina (0,04 UI) son test que permite
diferenciarlos de los Micrococcus [16, 10].
De las 46 muestras colectadas de caninos con historial de
otitis externa se aislaron 30 cepas de Staphylococcus spp., lo que
representa un 65,21 % de positividad a este género bacteriano, el
34,79 % restante mostraron crecimiento a bacilos Gram negativos y
positivos. De acuerdo al perl de sensibilidad y resistencia bacteriana
(TABLA I), las cepas aisladas en este estudio mostraron mayor
sensibilidad a la Gentamicina (100 %), seguida de Doxicilina (96,67 %)
y Cefoxitina (90 %). Dentro de los antimicrobianos que presentaron
mayor resistencia in vitro fueron la Eritromicina (26,66 %), seguida
de la Clindamicina (23,33 %) y la Levooxacina (23,33%).
El grado de resistencia a familias de antibióticos (TABLA II), las
Lincosamidas (23,33 %), Macrólidos (21,66 %), Fluoroquinolonas
(16,66 %) desarrollaron mayor resistencia in vitro.
Esta investigación obtuvo un 65,21 % de muestras positivas a
Staphylococcus spp., el cual es una de las bacterias que se encuentran
con mayor frecuencia en otitis externa de caninos, coincidiendo
con reportes previos de otros autores [12, 17, 18, 19], varios estudios
reportan que Staphylococcus spp., es una de los géneros bacterianos
más prevalentes en la microbiota de pacientes clínicamente
saludables [12, 13].
Tomando en cuenta las categorías de antibióticos evaluadas
en este estudio, queda evidenciado que los Macrólidos exhiben el
índice más elevado de resistencia, (21,67 %) y Lincosamidas (23,33 %),
compatible a otros resultados donde se encontró un 27 % [21] y
un 21 % de resistencia a los macrólidos [22], antibióticos que son
TABLA I
Perl de sensibilidad y resistencia antimicrobiana en cepas de
Staphylococcus spp. (n = 30) aislados de caninos con otitis externa
Susceptibilidad (%)
Grupo
Familia de
antibióticos
Antibiótico S I R
A
Betalactámicos
Cefoxitina 27(90) – 3 (10,00)
Macrólidos
Eritromicina 11 (36,67) 11 (36,67) 8 (26,66)
Azitromicina 20 (66,66) 5(16,66) 5 (16,66)
Sulfas
Sulfametoxazol–
Trimetropin
25 (83,33) 2 (6,67) 3 (10,00)
Lincosamidas
Clindamicina 14 (47,00) 9 (30,00) 7 (23,33)
B Tetraciclinas
Minociclina 26 (86,67) 1 (3,33) 3 (10,00)
Doxiciclina 29 (96,67) 0 (0) 1 (3,33)
Tetraciclina 23 (76,67) 5 (16,66) 2 (6,67)
C
Fluoroquinolonas
Ciprooxacina 25 (83,33) 2 (6,67) 3 (10,00)
Levooxacina 21 (70,00) 2 (6,67) 7 (23,33)
Moxioxacina 25 (83,33) 0 (0) 5 (16,66)
Aminoglucósidos Gentamicina 30 (100) 0 (0) 0 (0)
S: sensible, I: intermedio, R: Resistente.
TABLA II
Porcentaje promedio de resistencia bacteriana a familia
de antibióticos en cepas de Staphylococcus spp., (n =
30) aislados de caninos con otitis externa
Resistencia
Grupo Familia de antibióticos %
A
Betalactámicos 10,00
Sulfonamidas 10,00
Macrólidos 21,66
Lincosamidas 23,33
B Tetraciclinas 6,67
C
Fluoroquinolonas 16,66
Aminoglucósidos 0
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considerados por el CLSI como drogas terapéuticas de tipo A de
uso rutinario, estos dos grupos de antibióticos comparten el mismo
mecanismo de acción inhibiendo la síntesis de proteínas a nivel a
subunidad 50S de los ribosomas [23].
Al realizar el análisis con el disco de Cefoxitina como representante
de los betalactámicos, se observó una marcada sensibilidad del
90 % y una baja resistencia del 10 %, indicando así una prevalencia
reducida de posibles meticilinoresistentes, datos semejantes fueron
encontrados en S. intermedius, por otras investigaciones [24, 25],
11 % en Staphylococcus spp. [26], a pesar de estos resultados,
consideramos que se hace necesario ejecutar más estudios con la
identicación fenotípicas a nivel de especie o pruebas moleculares a
n de detectar la presencia del gen mecA. Sin embargo, muchos análisis
cientícos revelan que los métodos fenotípicos al igual que los métodos
moleculares son buenos predictores de meticilinoresistencia [26, 27].
Los resultados del análisis con el disco de Cefoxitina como
representante de los betalactámicos, mostró una marcada
sensibilidad del 90 % y una baja resistencia del 10 %, indicando así una
prevalencia reducida de posibles resistencias a Meticilina. Las cepas
de Staphylococcus spp. resistente a Cefoxitina también exhibieron
resistencia simultánea a Azitromicina, Clindamicina, Tetraciclina y
Ciprooxacina, este resultado concuerda a lo encontrado por otro
estudio [26], donde 10 cepas de Staphylococcus spp., presentaron
resistencias concomitantes a Sulfametoxazol, Trimetoprim,
Licosamidas, Tetraciclinas comprobando que las bacterias metilino–
resistentes, también presentan resistencia a otros grupos de
antibióticos no betalactámicos.
La resistencia a las Sulfametoxazol–Trimetropin y las Tetraciclinas
fue tan solo de un 10 y 6,66 % respectivamente, Estos datos dieren
a los encontrados por otros trabajos que reportan resistencias de
hasta 63,6 % y 61,4 % en Staphylococcus pseudintermedius [28]
Por otro lado, se obtuvo un porcentaje de resistencia a las
Fluoroquinolonas del 16,66 % diferente a lo encontrado en S.
intermedius 1,7 % [22], y un 0 % [29]. Otras publicaciones mencionan
porcentajes de resistencias entre 45,1 al 46,1 % a las Fluoroquinolonas,
estas drogas no deben ser usadas como antibióticos de primera
línea, su uso deber ser sugerido por un cultivo y antibiograma [30].
El mejor grupo de antibióticos para el tratamiento de una otitis
causada por Staphylococcus spp., son preparaciones óticas, a partir
de base de Aminoglucósidos especialmente Gentamicina [12], lo que
corrobora lo encontrado en esta investigación donde todos los aislados
bacterianos fueron sensibles a la Gentamicina (100 %). Sin embargo,
por los efectos colaterales de ototoxicidad de los Aminoglucósidos
estos preparados deben ser utilizados con cautela [17].
El método de Kirby–Bauer empleado para la ejecución del
antibiograma en la presente investigación utiliza concentraciones
bajas de antibióticos, comparándolas con las concentraciones que
alcanzarían en el plasma. Es importante tener en cuenta que muchas
drogas podrían ser utilizadas como preparaciones tópicas, lo que
permite que el medicamento actúe con una concentración más
elevada, incluso en el caso de un antibiótico que pareciera resistente
en el antibiograma [30].
El uso indiscriminado de antibióticos en el campo de medicina
veterinaria y humana es un grave problema para la salud pública
y animal, ya que por presión selectiva de desarrollan bacterias
multirresistentes, haciendo que estos microrganismos formen parte
de una microbiota residente y convirtiéndose en un problema con
potencial zoonótico, dado la proximidad que existe entre los humanos
y los animales de compañía, corriendo el riesgo de transmisión de
cepas multirresistentes de animales para el hombre o viceversa
[26, 31, 20] .
CONCLUSIONES
La prevalencia de Staphylococcus spp. fue 65,21 %, considerándose
estos hallazgos de forma signicativa en las muestras de caninos con
historial de otitis externa, lo que sugiere una implicación frecuente en
estas infecciones. Las cepas aisladas mostraron una alta sensibilidad
a la Gentamicina (30 %), Doxiciclina (96,6 %), y Cefoxitina (90 %),
antibióticos que podrían ser considerado en futuros tratamientos.
La mayor resistencia in vitro se encontró en las Lincosamidas (23,3 %),
Macrólidos (21,6 %) y Fluoroquinolonas (16,6 %), lo que sugiere una
necesidad de vigilancia y gestión adecuada de estos antibióticos en
Otitis externa en canino por Staphylococcus spp. / Sánchez-Prado y cols.__________________________________________________________
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el tratamiento de infecciones por Staphylococcus spp. en caninos. Es
importante que en los casos de otitis externa en caninos se considere
conveniente al cultivo y antibiograma como una herramienta de
vigilancia epidemiológica y diagnóstico clínico rutinario para la
elección de antimicrobiano apropiado y para disminuir la diseminación
de bacterias multirresistentes.
Conicto de intereses
Los autores declaran no tener conicto de intereses.
Rol de los autores
RGSP: Análisis Formal, Investigación, Metodología, Redacción–
revisión y edición. JPSE, RESP, SCGP, FLAG, LECT, DEPO, JEPR:
Análisis Formal, Investigación, Redacción–revisión y edición.
Los autores declaran que no violaron u omitieron normas éticas o
legales en esta investigación.
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