DOI: https://doi.org/10.52973/rcfcv-e32165
Recibido: 15/06/2022 Aceptado: 16/07/2022 Publicado: 31/08/2022
1 de 5
Revista Cientíca, FCV-LUZ / Vol. XXXII, rcfcv-e32165, 1 - 5
RESUMEN
A lo largo del tiempo, la población de gatos domésticos ha ido
en constante aumento, mejorando su relación con el hombre e
intensicando su interés sobre las enfermedades que afectan a los
felinos; una de estas enfermedades es la Leucemia viral felina (ViLeF),
que se transmite mediante el contacto con gatos infectados o fómites,
lo que debilita el sistema inmune permitiendo complicaciones con
diversas enfermedades oportunistas, entre las más encontradas
está la micoplasmosis, enfermedad hemotrópica que destruye los
eritrocitos produciendo anemia, que puede llevar a la muerte. El
objetivo del estudio fue determinar las complicaciones hematológicas
causadas por la presencia de Mycoplasma spp. en gatos con leucemia
viral felina. Se tomaron muestras de gatos que ingresaron con signos
compatibles con ViLeF para realizarles pruebas de inmunoensayo de
Idexx y frotis de sangre capilar (n=100). Además, a todos los pacientes
se les realizó un hemograma con el n de observar las complicaciones
hematológicas presentes. De las muestras tomadas se obtuvieron 30
gatos positivos a ViLeF y de estos 30 gatos, 21 (70%) también tenía
Mycoplasma spp. Las alteraciones hematológicas más encontradas
en estos pacientes fueron: anemia, neutrolia y trombocitopenia.
Concluyendo el estudio se pudo comprobar la importancia de
evaluar a los gatos con signos sugestivos de esta enfermedad viral,
realizándoles pruebas y evaluando su estado hematológico, debido
a la estrecha relación con micoplasmosis y la potencial posibilidad
de complicación del cuadro.
Palabras clave: Felis catus; frotis capilar; hemograma; inmunoensayo;
ViLeF
ABSTRACT
Over the time, the population of domestic cats has been constantly
increasing, improving their relationship with man and intensifying
their interest in diseases that affect cats, one of these diseases
is feline viral leukemia (ViLeF) that is transmitted by contact with
infected cats or fomites, which weakens the immune system, allowing
complications with various opportunistic diseases, among the
most found is mycoplasmosis, a hemotropic disease that destroys
erythrocytes producing anemia, which can lead to death. The aim
of the study was to determine the hematological complications
caused by the presence of Mycoplasma spp. in cats with feline
viral leukemia. Samples were taken from cats that were admitted
with signs compatible with ViLeF to perform Idexx immunoassay
tests and capillary blood smears (n=100). In addition, all patients
underwent a complete blood count in order to observe hematological
complications. Of the samples taken, 30 ViLeF-positive cats were
obtained and of these 30 cats, 21 (70%) also had Mycoplasma spp.
The most common hematological complications in these patients
were: anemia, neutrophilia and thrombocytopenia. Concluding the
study, it was possible to verify the importance of evaluating cats
with signs suggestive of this viral disease, performing tests and
evaluating their hematological status, due to the close relationship
with mycoplasmosis and the potential possibility of complicating
the condition.
Key words: Felis catus; capillary blood smear; complete blood
count; immunoassay; ViLeF
Complicaciones hematológicas causadas por la presencia de
Mycoplasma spp. en gatos con leucemia viral felina
Hematological complications caused by the presence of Mycoplasma spp.
in cats with feline viral leukemia
Elsa Valle-Mieles
1,2
* , Darwin Villamarín-Barragán
1
, Gloria Mieles-Soriano
3
y Mauricio Valle-Garay
3
1
Universidad Católica de Cuenca, Cuenca, Azuay, Ecuador.
2
Clínica Veterinaria “Dr. Pet”, Guayaquil, Guayas, Ecuador.
3
Universidad Agraria del Ecuador, Guayaquil, Guayas, Ecuador.
*Correo electrónico: elsa.valle.22@est.ucacue.edu.ec
Mycoplasma spp. en gatos con leucemia viral felina / Valle-Mieles y col. ______________________________________________________________
2 de 5
INTRODUCCIÓN
A lo largo del tiempo, la población de gatos domésticos (Felis
catus) ha incrementado constantemente, mejorando la relación
con el hombre [7], lo cual conlleva a intensicar el interés de los
propietarios sobre las enfermedades que aquejan a sus mascotas
[9], unas de éstas enfermedades son las de transmisión viral, las
cuales son muy frecuentes en el medio debido a la gran cantidad de
gatos y el poco conocimiento sobre sus medidas preventivas [5].
Dentro de las enfermedades virales se encuentra la Leucemia
viral felina (ViLeF), producida por un retrovirus causante de dicha
enfermedad, el cual se transmite mediante el contacto estrecho
de gatos infectados o fómites con gatos susceptibles y produce
alteraciones en el sistema inmune en gatos [5]. Por lo tanto, con
un sistema inmune deteriorado, diversas patologías aprovechan
empeorando el cuadro [12]. Uno de los principales patógenos
oportunistas es Mycoplasma spp., el cual es transmitido por picaduras
de pulgas (Ctenocephalides felis) infectadas y ataca los eritrocitos
llevándolos a su destrucción; en algunos casos se da un cuadro
asintomático, mientras que en otros, puede llevar a la muerte del
animal debido a una destrucción masiva de eritrocitos [1]. Estas
enfermedades aumentan día a día, por ende, se necesita enfocar
medidas para mejorar el diagnóstico, tratamiento y poder controlar
la situación de la enfermedad.
El ViLeF presenta signología clínica muy variable debido a que suele
presentar complicaciones como infecciones bacterianas secundarias
[17]. Sin embargo, entre los signos de alerta se encuentra la anorexia,
depresión y pérdida de peso [3].
Este virus cuenta con una fácil transmisión, según Molina [15] se
puede dar de manera vertical de madres a cachorros a través de
la placenta, durante el parto o lactancia, mientras que de manera
horizontal se transmite por comportamientos sociales entre los gatos,
siendo común en lugares donde no existe una tenencia adecuada
de ellos.
Para su diagnóstico se utilizan pruebas que identican la proteína
antigénica p27 del virus, desde la tercera semana de infección, en
sangre entera, suero, plasma o secreciones corporales, con una
sensibilidad aproximada del 99,3% y una especicidad del 99,8%.
Estas pruebas no reaccionan ante la presencia de anticuerpos
maternos ni los obtenidos por vacunaciones [3].
En la actualidad, no existe un tratamiento ecaz para la eliminación
completa de este virus, por lo tanto, el tratamiento de elección es
paliativo, con un manejo especial dependiendo el cuadro clínico y
enfermedades secundarias [5].
La micoplasmosis felina o anemia infecciosa felina es una de las
principales enfermedades oportunistas encontradas en conjunto
con ViLeF, ocasionada por Mycoplasma spp., la cual es una bacteria
hemotrópica Gram negativa extracelular, se ubica en la supercie
de los glóbulos rojos (GR), causando infecciones que producen la
destrucción de los mismos llevando al paciente a un cuadro de
hemólisis aguda asociada a anemia, que en casos graves, puede
ocasionar la muerte [11]. A pesar de que la vía común de transmisión
es mediante la picadura de la pulga del gato, la inoculación por peleas
y transfusiones de sangre infectada con esta bacteria también puede
ocasionar su transmisión [16].
El diagnóstico de esta enfermedad se realiza mediante la relación
de los signos clínicos y la identicación de la bacteria en la supercie
de los GR en frotis de sangre teñidos con colorantes hematológicos
y con ayuda de un microscopio biológico [14]. Se ha demostrado
que este método tiene una correlación signicativa con la técnica
molecular, por lo tanto, la observación del frotis de sangre tiene alto
valor diagnóstico, dependiendo de la habilidad de reconocimiento y
experticia del veterinario laboratorista [13].
El cuadro clínico es variable, se puede presentar asintomáticamente
como producir cuadros graves de anemia hemolítica, más aún si tiene
alguna enfermedad de base o con un sistema inmune deteriorado
debido a que es una enfermedad oportunista [4]. Sin embargo,
Molina y Pacheco [16] detallan que los signos más comunes son:
mucosas pálidas o ictéricas, taquicardia, linfadenomegalia regional
o generalizada, depresión, anorexia, pérdida de peso, hipertermia.
El tratamiento depende del cuadro clínico, se sugiere que en casos
de anemia recuperar la pérdida de sangre mediante transfusiones o
fármacos estimulantes de la medula ósea, mientras que para eliminar
a las bacterias se recomienda utilizar tetraciclinas o uoroquinolonas
[4].
El objetivo del presente estudio fue determinar la presencia de
Mycoplasma spp. en gatos con ViLeF y sus alteraciones hematológicas.
MATERIALES Y MÉTODOS
El presente estudio fue realizado de enero a abril del 2022, donde se
tomaron muestras sanguíneas a 100 pacientes felinos que ingresaron
a consulta general en la clínica veterinaria Dr. Pet, Guayaquil, Ecuador
con signología compatible con ViLeF.
Toma de muestras
Las muestras obtenidas fueron de sangre periférica (2 mililitros
-mL-) mediante la punción de la vena yugular externa con agujas
hipodérmicas 23G en jeringas de 3 mL y fueron colocadas en tubos de
tapa lila conteniendo anticoagulante ácido etilendiaminotetraacético
(EDTA). Luego se procedió a tomar una gota de sangre capilar
mediante la punción de vasos sanguíneos capilares en el pabellón
auricular para la realización de frotis de sangre capilar.
Pruebas ELISA SNAP Combo FeLV/FIV de Idexx
Las muestras en tubos de tapa lila con EDTA se utilizaron para
detectar ViLeF, para lo cual se realizaron las pruebas de inmunoensayo
comercial ELISA SNAP Combo FeLV/FIV (Laboratories Idexx, Toronto,
Canadá), colocando 3 gotas de la muestra (0,15 mL) y 4 gotas del
reactivo (0,20 mL) en un tubo eppendorf proporcionado en la prueba,
homogenizando la mezcla y vertiéndola en el SNAP, como indica el
fabricante, para luego de 30 a 60 segundos (seg) activarlo y esperar
los resultados. En todas las pruebas correctamente realizadas se
marcó un control positivo en el centro de la prueba, la presencia de
un punto marcado a lado derecho indicaba un resultado positivo al
ViLeF, mientras que su ausencia indicaba un resultado negativo.
Frotis capilares para la detección de Mycoplasma spp.
Con respecto a los frotis de sangre capilar, primero se esperó
a que se secaran por completo y se procedió a realizar la tinción
Diff Quick, colocando las placas,15 seg en el jador, luego 15 seg
en la primera coloración y 15 seg en la segunda coloración, se
enjuagaban las placas con agua corriente, se esperaba a que secaran
al ambiente y se procedió a observar los frotis capilares ya teñidos
FIGURA 1. Alteraciones hematológicas en gatos con ViLeF
FIGURA 2. Alteraciones hematológicas en gatos con Mycoplasma spp.
________________________________________________________________________Revista Cientica, FCV-LUZ / Vol. XXXII, rcfcv-e32165, 1 - 5
3 de 5
en el microscopio biológico Q190A (Better Scientic , Alemania)
con el lente de 100x, añadiendo aceite de inmersión de Merck para
microscopía. La observación de inclusiones bacterianas de morfología
cocoide dispuestas individualmente o en pares, con un tamaño de
0,3 a 0,8 micrometros (µm), en la supercie del eritrocito, indicaban
presencia de Mycoplasma spp., mientras que la no observación de
inclusiones indicaba su ausencia.
Hemograma
Con la muestra restante de los tubos de tapa lila con EDTA, se
realizaron los hemogramas en el analizador hematológico de Abaxis
Inc. (VetScan, HM5, Hungría) para obtener los valores en la serie blanca
(neutrólos, linfocitos, monocitos, eosinólos, basólos), en la serie
roja (hematocrito) y plaquetas.
Análisis estadístico
Todos los datos obtenidos de los pacientes que ingresaron al
estudio fueron registrados en tablas de Excel, en ella se incluyeron
los datos del paciente, seguido del resultado positivo o negativo de
las pruebas SNAP Combo FeLV/FIV, luego la presencia o ausencia
de Mycoplasma spp. al frotis capilar y por último las alteraciones
encontradas en el hemograma.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Se encontró que 30 gatos (30%) dieron positivo a ViLeF y de los
70 pacientes restantes (70%), salieron negativos a esta enfermedad
(TABLA I). Se detectaron 25 pacientes (25%) con presencia de
Mycoplasma spp., y 75 pacientes (75%) no tenían Mycoplasma spp.
(TABLA II). De los 30 pacientes que resultaron positivos a ViLeF, el 70%,
es decir 21, también tenían Mycoplasma spp., mientras que el 30%, es
decir 9 pacientes solo tuvieron ViLeF sin Mycoplasma spp. (TABLA III).
Las alteraciones hematológicas más frecuentemente encontradas
en pacientes positivos solo a ViLeF (9), descartando a los pacientes
que tenían en conjunto ViLeF y Mycoplasma spp. (21), las alteraciones
hematológicas fueron: en primer lugar, linfocitosis y neutrolia, con un
44% de ocurrencia cada una, es decir 4 pacientes de 9 diagnosticados
con ViLeF tuvieron linfocitosis, al igual que 4 pacientes de 9 tuvieron
neutrolia, mientras que, un 22% (2/9) tuvieron linfopenia, luego
seguidas por monocitosis, neutropenia, monocitopenia, anemia y
trombocitopenia que se encontraron en un 11% de los pacientes
cada una (1/9) (FIG 1).
TABLA I
Resultados de las pruebas SNAP Combo FeLV/FIV
realizadas
Pacientes con ViLeF 30 30 %
Pacientes negativos a ViLeF 70 70 %
Total de pacientes 100 100 %
TABLA II
Resultados de la observación de los frotis capilares
Pacientes con Mycoplasma spp. 25 25 %
Pacientes sin Mycoplasma spp. 75 75 %
Total de pacientes 100 100 %
TABLA III
Relación entre gatos con ViLeF y Mycoplasma spp.
Pacientes positivos a ViLeF 30 100 %
Pacientes con ViLeF y Mycoplasma spp. 21 70 %
Pacientes con ViLeF sin Mycoplasma spp. 9 30 %
Las alteraciones hematológicas más observadas en gatos solo
diagnosticados con Mycoplasma spp. (4), fueron: linfopenia, neutrolia
y anemia, las tres con un 50% de ocurrencia cada una, es decir se
encontraron en 2 de 4 pacientes con Mycoplasma spp. mientras
que en un 25% de pacientes (1/4) se encontró monocitopenia y
trombocitopenia (FIG 2).
FIGURA 3. Alteraciones hematológicas en gatos con ViLeF y
Mycoplasma spp.
Mycoplasma spp. en gatos con leucemia viral felina / Valle-Mieles y col. ______________________________________________________________
4 de 5
Las alteraciones hematológicas más observadas en gatos con
Mycoplasma spp. y con ViLeF (21) fueron: anemia con un 90%, es decir
encontrada en 19 de 21 gatos, seguido de neutrolia encontrada en un
62%, es decir en 13 de 21, continuaba con trombocitopenia en un 52%
(11/21), luego linfopenia se observó un 23%, (5/21), monocitopenia,
observada en un 19% (4/21) y por último se encontró linfocitosis y
neutropenia en un 10% cada una (2/10) (FIG 3).
la inmunosupresión que produce el virus, así mismo disminuyen los
valores de la serie roja y plaquetas, ya que, al darse la replicación viral
en la médula ósea, ésta se puede afectar, resultando en displasia,
hipoplasia o aplasia medular [1].
La población total de gatos sanos y enfermos en el estudio
sobre ViLeF de Ávila y col. [3] presentaron valores de glóbulos
blancos, hematócrito y plaquetas dentro de los valores normales
de referencia, a diferencia del presente estudio, en el cual se
encontraron diversas alteraciones hematológicas, lo que concuerda
con Gonçalves y col. [8], que reportan que todos los pacientes con
ViLeF presentaban alguna alteración hematológica, tanto en la serie
blanca (linfopenia, neutropenia), como en la serie roja (anemia) y
plaquetas (trombocitopenia).
La micoplasmosis se suele caracterizar por cuadros moderados
a graves de anemia, debido a la hemólisis causada por estos
microorganismos. Como se describe en el estudio de Molina y Pacheco
[16], en donde se encontró la anemia como alteración hematológica
más frecuente en la muestra estudiada. En la investigación publicada
por Merino y col. [14] se reportó que un 25% de gatos anémicos
fueron positivos a Mycoplasma spp..
CONCLUSIONES
Los resultados de este estudio demostraron que la ViLef está
subdiagnosticada, razón por la cual es importante realizar pruebas
a todos los pacientes con signología aparente, de ser positivo se
debe complementar con un estudio hematológico y frotis sanguíneo
capilar ya que se comprobó que la micoplasmosis es un patógeno
secundario en un alto porcentaje de pacientes positivos a VileF, la
cual provoca anemia hemolítica y conlleva a graves complicaciones
que disminuyen signicativamente las posibilidades de sobrevida
de los gatos infectados.
AGRADECIMIENTOS
Se agradece la colaboración de la Clínica Veterinaria Dr. Pet,
Guayaquil.
Conicto de intereses
Los autores certican que no existe conicto de intereses en la
presente investigación.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
[1] ALMEIDA, N.; CASTRO, L.; BRITO, A. Alterações clínicas e
hematológicas em gatos domésticos naturalmente infectados
pelo Vírus da Leucemia Felina (FeLV). Rev. de Saúde. 7(1): 27–32.
2016. https://doi.org/h9td.
[2] ARJONA, A.; ESCOLAR, E.; SOTO, I.; BARQUERO, N.; MARTIN,
D.; GOMEZ, E. Seroepidemiological survey of infection by
feline leukemia virus and immunodeciency virus in Madrid
and correlation with some clinical aspects. J. Microbiol. 38(9):
3448– 3449. 2000. https://doi.org/h9tf.
[3] ÁVILA, J.; PARRA, O.; BARRIOS, L.; BELLO, M.; ZAMBRANO, L.;
GONZÁLEZ, J. Prevalencia de leucemia viral felina, inmunodeciencia
viral felina y dirolariosis felina en gatos. Rev. Científ. FCV-LUZ. XV(4):
285–292. 2015.
A nivel mundial se han realizado diversos estudios sobre la
prevalencia de ViLeF, como ya se conoce, en este estudio fue del
28%, mientras tanto, Massey y col. [12] describen que en Chile, la
prevalencia fue del 20%, en otros países como Brasil, los autores
Arjona y col. [2] reportaron la ocurrencia del 12% de la enfermedad,
en Japón, Ishida y col. [10] encontraron un 28,9%, en Francia,
Courchamp y col. [6] un 19,6%, y Estados Unidos, según Yamamoto
y col. [18] hay un 14%. Se puede ver que la prevalencia de ViLeF se
comporta de manera muy similar en varios países, este hallazgo se
debe a que el contagio se realiza a partir del contacto directo entre
gatos enfermos y gatos susceptibles, lo cual coincide con sus hábitos
de acicalamiento, apareamiento y convivencia, además que, los
programas de prevención parecen ser insucientes [15].
Así mismo, Biondo y col. [4] describieron diversos porcentajes
de prevalencia de Mycoplasma spp. en gatos aparentemente sanos,
por ejemplo de Brasil, en Sao Paulo se encontró una prevalencia del
8%, en Botucatu 15%, en Rio de Janeiro 16%, y 38% en Curitiba,
al igual que en Chile, Merino y col. [14] plantearon la prevalencia del
28%. Mientras que, por otro lado, en Colombia, Méndez y col. [13]
reportaron que se obser Mycoplasma spp. en un 80% en Pereira
y un 70% en Bogotá, en gatos de refugios con sinología sugerente
a la enfermedad, lo cual coincide con los resultados del presente
estudio, debido a que se seleccionaron gatos con mayor posibilidad
de encontrar esta enfermedad.
En cuanto a los hallazgos hematológicos en gatos con ViLeF, se
ha descrito que son dinámicos, es decir varían dependiendo la fase
de la enfermedad, encontrándose por lo general valores normales
o ligeramente aumentados en los leucocitos al comienzo de la
viremia, luego, en estadios crónicos, suelen disminuirse, debido a
________________________________________________________________________Revista Cientica, FCV-LUZ / Vol. XXXII, rcfcv-e32165, 1 - 5
5 de 5
[4] BIONDO, A.; DOS SANTOS, A.; GUIMARÃES, A.; VIEIRA, R. A review
of the occurrence of hemoplasmas hemotrophic mycoplasmas in
Brazil. Rev. Brasileira de Parasitol. Vet. 18(3): 1–7. 2009. https://
doi.org/b2vb5x.
[5] CAMACHO, W.; RODRÍGUEZ, C.; ROJAS, P.; STERLING, C.;
SANCHEZ, D. Leucemia e inmunodeciencia felina. Reporte
de un caso. Rev. Electr. Vet. 18(10): 1–9. 2017.
[6] COURCHAMP, F.; YOCCOZ, N.; ARTOIS, M.; PONTIER, D. At-risk
individuals in Feline Immunodeciency Virus epidemiology:
evidence from a multivariate approach in a natural population
of domestic cats (Felis catus). Epidemiol. Infect. 121(1): 227–236.
1998. https://doi.org/fvhvs4.
[7] FLOREZ, A.; SOLANO, J. Estudio demográco de la población
de perros y gatos domiciliados en el sector suroriental de
Bucaramanga, Colombia. Rev. Invest. Vet. Perú. 30(2): 828–835.
2019. https://doi.org/h9tg.
[8] GONÇALVES, H.; MAGRI, C.; HIURA, E.; HERZOG, L.; PUCHETA, A.;
FERREIRA, L.; RIBEIRO, V.; RIBEIRO, F. Prevalência de Leucemia
Viral Felina (FeLV) e principais alterações hematológicas em
felinos domésticos em Vila Velha, Espírito Santo. Res. Soc.
Developm. 10(6): 1–8. 2021. https://doi.org/h9th.
[9] IBARRA, L.; MORALES, M. Vista de Aspectos demográcos de
la población de perros y gatos en la ciudad de Santiago, Chile.
Avan. Cien. Vet. 18(1): 13–20. 2017.
[10] ISHIDA, T.; WASHIZU, T.; TORIYABE, K.; MOTOYOSHI, S.; TOMODA,
I.; PEDERSEN, N. Feline immunodeciency virus infection in
cats of Japan. J. Ame. Vet. Med. Assoc. 15(2): 221–225. 1989.
[11] MACHADO, P.; DE SOUZA, D.; MARQUES, E. Micoplasmose em
felinos doméstico: revisão de literatura. Rev. Cientif. Electr.
Med. Vet. 9(16): 10–25. 2012.
[12] MASSEY, D.; CUERVO, S.; LAGOS, M. Vista de Incidencia de los
virus de inmudeciencia y leucemia en Felis catus en la Clínica
Veterinaria Gattos Tunja-Boyacá. Cien. Desarrollo. 10(1): 9–17.
2019. https://doi.org/h9tj.
[13] MÉNDEZ, L.; MONTOYA, L.; MAZO, M.; SEPÚLVEDA, J.; VALENCIA,
E.; PORTILLA, T.; RESTREPO, L. Comparación diagnóstica entre
análisis citológico y molecular para la detección de Mycoplasma
haemofelis en gatos residentes de la ciudad de Pereira, Risaralda,
Colombia. Rev. Invest. Vet. Perú. 33(1): 30–39. 2022. https://doi.
org/h9tk.
[14] MERINO, V.; ISLAS, A.; RIVERA, P.; CRUZ, A.; TARDON, R.
Detección de Mycoplasma haemofelis y “Candidatus Mycoplasma
haemominutum” a través de PCR en gatos de la comuna de
Chillán. Hospit. Vet. 3(2): 49–56. 2011.
[15] MOLINA, V. Prevalencia del virus de la leucemia felina (ViLeF) en
el sur del Valle de Aburrá, Colombia. Rev. Med. Vet. 1(40): 9–16.
2020. https://doi.org/h9tm.
[16] MOLINA, V; PACHECO, C. Manejo terapéutico de lipidosis hepática
felina por Mycoplasma haemofelis en Medellín, Colombia: caso
clínico. Rev. Cientif. FCV-LUZ. XVI(3): 142–149. 2016.
[17] TIQUE, V.; SANCHEZ, A.; ALVAREZ, L.; RIOS, R.; MATTAR, S.
Seroprevalencia del virus de leucemia e inmunodeciencia
felina en gatos de montería, Córdoba. Rev. Fac. Med. Vet. Zoot.
56(2): 85–94. 2009.
[18] YAMAMOTO, J.; HANSEN, H.; HO, E.; MORISHITA, T.; OKUDA, T.;
SAWA, T.; NAKAMURA, R.; PEDERSEN, N. Epidemiologic and clinical
aspects of feline immunodeciency virus infection in cats from
the continental United States and Canada and possible mode of
transmission. J. Amer. Vet. Med. Assoc. 15(2): 213–220. 1989.