6
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2021, 38: 06-30. Enero-Marzo.
DOI: https://doi.org/10.47280/RevFacAgron(LUZ).v38.n1.01 ISSN 2477-9407
Esta publicación cientíca en formato digital es continuación de la Revista Impresa: Depósito legal pp 196802ZU42, ISSN 0378-7818.
Recibido el 01-05-2020 . Aceptado el 09-06-2020.
*Autor de correspondencia. Correo electrónico: luisa.villalba@ciens.ucv.ve
Algunos parámetros biológicos en la evaluación de
la estabilidad y la madurez de dos compost
Some biological parameters in the evaluation of the
stability and maturity of two compost
Alguns parâmetros biológicos na avaliação da estabilidade
e maturidade de dois compostos
Luisa Villalba
1*
, Jorge Paolini
2
y Carlos Rocha
3
1
Universidad Central de Venezuela. Facultad de Ciencias. Instituto
Zoología y Ecología Tropical (IZET). Caracas, Venezuela. Correo electrónico:
luisa.villalba@ciens.ucv.ve,
.
2
Instituto Venezolano de Investigaciones
Cientícas, IVIC. Altos de Pipe, Miranda, Venezuela. Correo electrónico:
mapire3000@gmail.com,
.
3
Universidad Simón Bolívar, Sartenejas,
Miranda, Venezuela. Correo electrónico: crocha@usb.ve.
Resumen
El compostaje representa una alternativa para el aprovechamiento de los
residuos orgánicos al transformarlos en una enmienda orgánica que mejora
la estructura y fertilidad de los suelos. Por ser un proceso microbiológico, se
planteó como objetivo analizar algunos parámetros biológicos en la evaluación
de la estabilidad y madurez de dos compost. Se elaboraron dos compost con
residuos generados en la Universidad Simón Bolívar uno obtenido a partir de
residuos orgánicos del comedor y otro a partir de restos vegetales provenientes
de la poda de los jardines. Los parámetros evaluados fueron la temperatura y
el contaje microbiano, expresado como unidades formadoras de colonias por
gramo de compost para levaduras y para bacterias aerobias y anaerobias (a su
vez clasicando las bacterias por el método de tinción Gram), así como el índice
de germinación determinado por el test de totoxicidad. Los resultados obtenidos
permitieron concluir que la temperatura de la pila de compost es un buen indicador
de la evolución del proceso de compostaje, al estar íntimamente asociado con la
actividad biológica indicando las etapas del proceso, en los compost analizados el
contaje microbiano permitió evaluarlos como estables, la clasicación bacteriana
por tinción Gram, representó un buen indicador de las sucesiones que ocurren en
7
Esta publicación cientíca en formato digital es continuación de la Revista Impresa: Depósito legal pp 196802ZU42, ISSN 0378-7818.
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2021, 38: 06-30. Enero-Marzo.
Villalba et al. ISSN 2477-9407
el proceso de compostaje y fue útil para ayudar a la clasicación de las bacterias
presentes; el test de totoxicidad permitió corroborar el grado de madurez y
estabilidad de los compost estudiados.
Palabras clave: compostaje, contaje microbiano, totoxicidad.
Abstract
Composting represents an alternative for the use of organic waste by
transforming it into an organic amendment that improves the structure and
fertility of soils. As it is a microbiological process, the objective was to analyze
some biological parameters in the evaluation of the stability and maturity of two
compost. Two compost was made with waste generated at the Simón Bolívar
University one obtained from organic waste generated in the dining room and
the other from plant remains from the pruning of the gardens. The parameters
evaluated were temperature and microbial count, expressed as colony-forming
units per gram of compost for yeast, and for aerobic and anaerobic bacteria (in turn
classifying the bacteria by the Gram staining method), as well as the germination
index determined by the phytotoxicity test. The results obtained allowed us to
conclude that: the temperature of the compost pile is a good indicator of the
evolution of the composting process, as it is closely associated with biological
activity indicating the stages of the process, in the compost analyzed, the counting
of microorganisms allowed to evaluate them as stable, the bacterial classication
by Gram staining, represented a good indicator of the successions that occur in
the composting process and was useful to help the classication of the bacteria
present; the phytotoxicity test corroborated the degree of maturity and stability
of the studied compost.
Keywords: composting, microbial count, phytotoxicity.
Resumo
A compostagem representa uma alternativa para o uso de resíduos orgânicos,
transformando-o em uma emenda orgânica que melhora a estrutura e a fertilidade
dos solos. Por se tratar de um processo microbiológico, o objetivo foi analisar
alguns parâmetros biológicos na avaliação da estabilidade e maturidade de dois
compostos. Dois compostos foram feitos com resíduos gerados na Universidade
Simón Bolívar, um obtido a partir de resíduos orgânicos da cantina e outro a
partir de restos de plantas provenientes de podas nos jardins. Os parâmetros
avaliados foram temperatura e contagem microbiana, expressos em unidades
formadoras de colônia por grama de composto para levedura e bactérias aeróbias
e anaeróbias (por sua vez, classicando as bactérias pelo método de coloração de
Gram), bem como o índice de germinação. determinado pelo teste de totoxicidade.
Os resultados obtidos permitiram concluir que a temperatura da pilha de
composto é um bom indicador da evolução do processo de compostagem, pois está
8
Esta publicación cientíca en formato digital es continuación de la Revista Impresa: Depósito legal pp 196802ZU42, ISSN 0378-7818.
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2021, 38: 06-30. Enero-Marzo.
Villalba et al. ISSN 2477-9407
intimamente associada à atividade biológica que indica as etapas do processo.No
composto analisado, a contagem microbiana permitiu avaliá-las como estáveis. ,
a classicação bacteriana por coloração de Gram representou um bom indicador
das sucessões que ocorrem no processo de compostagem e foi útil para auxiliar na
classicação das bactérias presentes; O teste de totoxicidade corroborou o grau
de maturidade e estabilidade do composto estudado.
Palavras-chave: compostagem, contagem microbiana, totoxicidade.
Introducción
El compostaje permite resolver un
problema de gestión de residuos sólidos
orgánicos debido a que representa una
alternativa práctica y económica para
su aprovechamiento, al transformarlos
en una enmienda con grandes virtudes
como mejorador y/o acondicionador de
suelos que facilita la disponibilidad
de nutrientes, mejora su estructura
y actúa como agente supresor de
patógenos vegetales (Bernal et al.,
2017; García et al., 2014; Rebollido et
al., 2008; Satoshi, 2013; van Elsas y
Postma, 2007).
La calidad de un compost, de
acuerdo a García et al. (2014) es
“la capacidad o aptitud del compost
para satisfacer las necesidades de
las plantas, con un mínimo impacto
ambiental y sin riesgo para la
salud pública”, y está determinada
por su madurez, denida ésta por
su estabilización biológica y su
“humicación”, así como también
por la ausencia de patógenos y de
metales pesados (Moreno y Moral,
2008; Román et al., 2013; Satoshi,
2013).
Los compost maduros presentan
concentraciones insignicantes de
sustancias totóxicas de carácter
orgánico (aquellas producidas
durante la fase más activa del proceso
Introduction
Composting allows solving an
organic solid waste management
problem because it represents a
practical and economic alternative for
its use, by transforming them into an
amendment with great virtues as a
soil improver and/or conditioner that
facilitates the availability of nutrients,
improves its structures and acts as a
suppressive agent for plant pathogens
(Bernal et al., 2017; García et al., 2014;
Rebollido et al., 2008; Satoshi, 2013;
van Elsas and Postma, 2007).
The quality of a compost, according
to García et al. (2014) is “the capacity
or aptitude of the compost to satisfy
the needs of the plants, with a
minimum environmental impact and
without risk to public health”, and is
determined by its maturity, dened
by its biological stabilization and its
“humication”, as well as the absence
of pathogens and heavy metals
(Moreno and Moral, 2008; Román et
al., 2013; Satoshi, 2013).
The mature compost presents
insignicant concentrations of
phytotoxic substances of organic
character (those produced during the
most active phase of the composting
process as short chain acids) or
inorganic, such as NH
3
. Thus, a mature
compost, according to Rivero (1999)
9
Esta publicación cientíca en formato digital es continuación de la Revista Impresa: Depósito legal pp 196802ZU42, ISSN 0378-7818.
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2021, 38: 06-30. Enero-Marzo.
Villalba et al. ISSN 2477-9407
de compostaje como ácidos de cadena
corta) o inorgánico, como por ejemplo
NH
3
. Es así, que un compost maduro,
de acuerdo con Rivero (1999) y Paul
(2015), debe haber cumplido con la
fase más activa del proceso (termóla)
en la que predominan bacterias de
los géneros Bacillus, Thermus e
Hydrogenobacter y Actinobacterias-
Streptomyces.
En este sentido, Cooperband et al.
(2003) y Moreno y Moral (2008),
señalan que la estabilidad del
compost se puede denir como
el grado de descomposición de la
materia orgánica o biodisponibilidad
de materia orgánica, la cual es función
directa del nivel de actividad de la
biomasa microbiana y determinada
por medio del O
2
consumido, el CO
2
desprendido o el calor producido
como resultado de la actividad
microbiológica.
Es poco lo que sabemos sobre los
microorganismos involucrados en
el proceso de compostaje debido a
la diversidad y estructura de estas
comunidades (Rebollido et al., 2008;
Partanen et al., 2010); en este sentido,
debido a su elevada complejidad, es la
actividad microbiológica un parámetro
importante que puede contribuir a
determinar la calidad del producto nal.
Así, por ejemplo, el grado de estabilidad
se puede determinar directamente a
partir del contaje de grupos microbianos
o de medidas de la actividad metabólica
o bien, indirectamente, por medio del
estudio de los constituyentes fácilmente
biodegradables o susceptibles a
la degradación (Departamento
de Agricultura de la DGA, 2001;
Ceustermans et al., 2010; Cervera et
al., 2012).
and Paul (2015), must have fullled
the most active phase of the process
(thermophilic) in which bacteria of
the genera Bacillus, Thermus and
Hydrogenobacter and Actinomycetes
of genus–Streptomyces predominate.
In this sense, Cooperband et
al. (2003) and Moreno and Moral
(2008), point out that stability of the
compost can be dened as the degree
of decomposition of organic matter
or bioavailability of organic matter,
which is a direct function of the level of
activity of the microbial biomass and
determined through the consumed O
2
,
the released CO
2
or the heat produced
as the result of the microbiological
activity.
Little is known about the
microorganisms involved in the
composting process due to the diversity
and structure of these communities
(Rebollido et al., 2008; Partanen
et al., 2010); in this sense, due to
its high complexity, the microbiol
activity is an important parameter
that can contribute to determining the
quality of the nal product. Thus, for
example, the degree of stability can
be determined directly from the count
of microbial groups or from measures
of metabolic activity or, indirectly,
through the study of constituents that
are easily biodegradable or susceptible
to degradation (Department of
Agriculture of the DGA, 2001;
Ceustermans et al., 2010; Cervera et
al., 2012).
For the microbial counting, direct
or indirect methods have been used.
In the rst case, the different groups
of microorganisms are isolated and
identied, by obtaining compost
10
Esta publicación cientíca en formato digital es continuación de la Revista Impresa: Depósito legal pp 196802ZU42, ISSN 0378-7818.
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2021, 38: 06-30. Enero-Marzo.
Villalba et al. ISSN 2477-9407
Para el contaje microbiano se
han utilizado métodos directos o
indirectos, en el primer caso se procede
al aislamiento e identicación de los
diferentes grupos de microorganismos,
mediante la obtención de extractos
de compost que luego son sembrados
en medios de cultivo, en general,
especícos para cada grupo a
identicar. La evaluación del
crecimiento y las características de las
colonias, por observación directa o al
microscopio, suministra información
acerca de las poblaciones presentes.
Las técnicas más utilizadas son el
contaje en placa y el número más
probable. En los denominados métodos
indirectos se agrupan aquellos
basados en propiedades funcionales
de los grupos microbianos, que pueden
medirse y luego relacionarse con
poblaciones presentes (Rivero, 1999).
Según la temperatura generada
durante el proceso de compostaje,
numerosos autores (De Bertoldi et
al. 1983; Insam y De Bertoldi, 2007;
Román et al., 2013; Paul, 2015)
identican cuatro fases, cada una
de las cuales está caracterizada por
la actividad de diferentes grupos
de organismos; así tenemos, una
primera fase de corta duración que
corresponde al tiempo necesario para
que los microorganismos se aclimaten
y colonicen el nuevo ambiente en la
pila de compost, está caracterizada
por un crecimiento microbiano
rápido, con un incremento desde la
temperatura ambiente hasta 40 - 45
°C, donde predominan organismos
mesólos (bacterias y hongos) capaces
de degradar los componentes de
fácil descomposición como azúcares
extracts that are then sown in different
cultura media, generally specic for
each group in order to identify them
identify. Evaluation of the growth and
characteristics of the colonies, by direct
observation or under a microscope,
provides information about the
populations present. The most used
techniques are the plate count and
the most probable number. In the so-
called indirect methods, those based
on the functional properties of the
microbial groups are grouped, which
can be measured and then related
to the populations present (Rivero,
1999).
According to the temperature
generated during the composting
process, numerous authors (De
Bertoldi et al., 1983; Insam and De
Bertoldi, 2007; Román et al., 2013;
Paul, 2015) identify four phases, each
of which is characterized by the activity
of different groups of organisms; thus
we have, a rst phase of short duration
that corresponds to time necessary for
the microorganisms to acclimatize and
colonize the new environment in the
compost pile, is characterized by rapid
microbial growth, with an increase
from room temperature to 40 - 45 °C,
where mesophilic organisms (bacteria
and fungi) capable of degrading easily
decomposable components such as
sugars and proteins predominate;
Subsequently, the thermophilic or
hygienization phase follows, where
the temperature rises above 45 °C
for several weeks where thermophilic
organisms responsible for the
degradation of complex carbon sources
such as celluloses, hemicelluloses,
lignins and chitins predominate;
11
Esta publicación cientíca en formato digital es continuación de la Revista Impresa: Depósito legal pp 196802ZU42, ISSN 0378-7818.
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2021, 38: 06-30. Enero-Marzo.
Villalba et al. ISSN 2477-9407
y proteínas; posteriormente, sigue
la fase termóla o de higienización,
donde la temperatura se eleva por
encima de los 45 °C durante varias
semanas donde predominan los
organismos termólos responsables
de la degradación de fuentes de
carbono complejas como celulosas,
hemicelulosas, ligninas y quitinas;
posteriormente al agotarse las fuente
de carbono y en especial de nitrógeno
en el material de compostaje,
comienza a enfriarse la pila, retornan
los organismos mesólos y el proceso
de compostaje continua hasta la fase
nal de maduración o neoformación de
sustancias húmicas que puede ser un
período de varios meses a temperatura
ambiente. De allí que la ora del
compost es extremadamente diversa.
En este contexto, el objetivo
del trabajo fue analizar algunos
parámetros biológicos en la evaluación
de la estabilidad y la madurez de dos
compost. Los parámetros evaluados
fueron la temperatura, el contaje
microbiano, expresado como unidades
formadoras de colonias por gramo
de compost para levaduras y para
bacterias aerobias y anaerobias (a su
vez clasicando las bacterias por el
método de tinción Gram), y el índice
de germinación determinado por el
test de totoxicidad.
Materiales y métodos
Se prepararon dos compost uno
identicado como compost comedor
(CC) y un segundo denominado
compost de jardín (CJ).
Compost de comedor (CC). Se
elaboró con base a restos orgánicos
Subsequently, when the carbon and
especially nitrogen sources in the
composting material are exhausted,
the pile begins to cool down, the
mesophilic organisms return and the
composting process continues until
the nal phase of maturation or new
formation of humic substances, which
may be a period several months at
room temperature. Hence, the compost
ora is extremely diverse.
In this context, the objective of the
work was to analyze some biological
parameters in the evaluation of
the stability and maturity of two
compost. The parameters evaluated
were temperature, microbial count,
expressed as colony-forming units
per gram of compost for yeast and
for aerobic and anaerobic bacteria
(in turn classifying the bacteria by
the Gram staining method), and
the and the germination index was
determined by the phytotoxicity test.
Materials and methods
Two compost were prepared, one
identied as dining room compost
(CC) and a second called garden
compost (CJ).
Dining Compost (CC). It was
made based on organic remains
generated in the dining room of the
Universidad Simón Bolívar (USB)
(eggshell, coffee grounds, legume
residues, vegetables, fruits that do
not include processed food, meat,
or fats), pruning remains (leaves
and branches, mainly) from garden
maintenance of the USB and soil
adjacent to the area where the
12
Esta publicación cientíca en formato digital es continuación de la Revista Impresa: Depósito legal pp 196802ZU42, ISSN 0378-7818.
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2021, 38: 06-30. Enero-Marzo.
Villalba et al. ISSN 2477-9407
generados en el comedor de la
Universidad Simón Bolívar (USB)
(cáscara de huevos, borra de café,
residuos de legumbres, hortalizas,
frutas que no incluye comida
elaborada, carnes, ni grasas), restos de
poda (hojas y ramas, principalmente)
del mantenimiento de las áreas
verdes de la USB y suelo aledaño a la
zona donde se hizo el compost, de tal
manera de ser utilizado como inóculo
de microorganismos.
Para la elaboración del CC primero
se hizo un inventario de los residuos
orgánicos generados en las áreas
verdes, así como en los comedores y
los cafetines de la USB; segundo, se
determinó el contenido de carbono
orgánico (Walkley y Black - digestión
con dicromato de potasio y colorimetría)
y nitrógeno total (método Kjeldahl -
digestión con ácido sulfúrico) de los
residuos orgánicos empleados; tercero,
se utilizó la metodología propuesta
por Richard y Trautmann (2002),
para estimar las cantidades de cada
material a utilizar en la preparación
de la mezcla, de tal manera de
obtener una relación inicial 30:1 de
C:N, aproximadamente. De allí que
se utilizaron tres partes de residuos
de jardín por una parte de residuos
de comedor y 0,30 % de suelo en la
elaboración de una pila de compost.
Compost de jardín (CJ). Este fue
el segundo compost que se evaluó,
y es el que realiza normalmente el
Vivero El Horticultor en la USB
(por condencialidad se reservan los
materiales y cantidades utilizados),
con base a restos de poda al cual le
agregan una mezcla multienzimática
denominada “Rizobact
®
”, para
compost was made, so as to be used
as an inoculum of microorganisms.
For preparation of the CC, an
inventory was rst made of the organic
waste generated in the canteens
and cafes of the USB; second,
the organic carbon content (Walkley
and Black - digestion with potassium
dichromate and colorimetry) and total
nitrogen (Kjeldahl method - digestion
with sulfuric acid) of the organic
residues used were determined;
third, the methodology proposed
by Richard and Trautmann (2002)
was used to estimate the quantities
of each material to be used in the
preparation of the mixture, in order
to obtain an initial 30:1 ratio of C:N,
approximately. Hence, three parts of
garden waste was used for one part of
dining room waste and 0.30 % of soil
in the preparation of a compost pile.
Garden compost (CJ). This was the
second compost that was evaluated,
and it is the one that is normally carried
out by the Nursery El Horticultor in
the USB (due to condentiality the
materials and quantities used are
reserved), based on pruning remains
to which they add a multienzyme
mixture called “Rizobact
®
”, to promote
microbial activity (to replace soil
microorganisms), it was identied as
garden compost (CJ).
Compost management. Both
compost (CC and CJ) were made
simultaneously, for each one a pile
(volume of approximately 9 m
3
) was
made on the ground in terrains of
the USB Nursery El Horticultor. The
compost piles lasted ve months (150
days), a composite sample was taken at
the beginning (M0) and subsequently
13
Esta publicación cientíca en formato digital es continuación de la Revista Impresa: Depósito legal pp 196802ZU42, ISSN 0378-7818.
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2021, 38: 06-30. Enero-Marzo.
Villalba et al. ISSN 2477-9407
promover la actividad microbiana (en
sustitución de los microorganismos del
suelo), el mismo fue identicado como
compost jardín (CJ).
Manejo del compost. Ambos
compost (CC y CJ) se realizaron
simultáneamente, para cada uno se
elaboró una pila (volumen de 9 m
3
aproximadamente) sobre el suelo en
terrenos del Vivero El Horticultor de
la USB. Las pilas de compost tuvieron
una duración de cinco meses (150
días), se tomó una muestra compuesta
al inicio (M0) y posteriormente una
cada mes (M1, M2, M3, M4, M5), para
un total de 6 muestras compuestas
(tomadas de 5 partes de la pila) por
cada tipo de compost.
Durante la preparación de los
compost se mantuvo la humedad y la
aireación en las pilas de compostaje,
mediante los volteos del material de
la pila con un payloader y luego la
aplicación de agua con una manguera.
Estas labores se hicieron cada 10 ó 15
días durante los tres primeros meses
y luego una vez al mes al nalizar el
proceso, midiendo en cada oportunidad
la temperatura con un termómetro
digital marca Hanna®, conectado con
una varilla utilizada como sensor,
la cual se introdujo al centro de la
pila desde varios sitios. La humedad
recomendada es de un 60 %, esto se
logró agregando a la pila de compost
el agua hasta que escurriera, momento
a partir del cual se dejaba de regar
(Trautmann y Krasny, 1998).
Cuanticación de la
población microbiana. Se
aplicaron las técnicas estándares
de microbiología especicadas
en el Manual de
Laboratorio de
one every month (M1, M2, M3, M4,
M5), for a total of 6 composite samples
(taken from 5 parts of the pile) for
each type of compost.
During compost preparation,
humidity and aeration were
maintained in the compost piles,
by turning the pile material with a
payloader and then applying water
with a hose. These tasks were carried
out every 10 or 15 days during the
rst three months and then once a
month at the end of the process, each
time measuring the temperature with
a Hanna® brand digital thermometer,
connected to a rod used as a sensor,
which is introduced to the center
of the pile from various places. The
recommended humidity is 60 %, this
was achieved by adding the water
to the compost pile until it drained,
at which point it stopped watering
(Trautmann and Krasny, 1998).
Microbial population quantification.
Standard microbiology techniques
specied in the USB Environmental
Microbiology Laboratory Manual (1999)
and considerations by Trautmann
and Krasny (1998) were applied. All
determinations were made in triplicate.
Aerobic bacterial population.
Colony forming units (UFC) per
gram of compost were determined by
seeding the sample on the surface on
the surface of agar nutrient plates
(Merck
®
), incubated at 37 °C for 48
hours in an aerobic environment.
Anaerobic bacterial population.
The procedure was the same as in
the previous procedure, except that
the samples were incubated in an
anaerobic jar (GasPak system) that
achieves anaerobiosis by introducing
14
Esta publicación cientíca en formato digital es continuación de la Revista Impresa: Depósito legal pp 196802ZU42, ISSN 0378-7818.
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2021, 38: 06-30. Enero-Marzo.
Villalba et al. ISSN 2477-9407
Microbiología Ambiental
de la
USB (1999) y consideraciones de
Trautmann y Krasny (1998). Todas
las determinaciones se realizaron por
triplicado.
Población bacteriana aeróbica. Se
determinaron las unidades formadoras
de colonia (UFC) por gramo de compost
a través de siembra de la muestra en
supercie para aislamiento en placas
de agar nutritivo (Merck
®
), incubadas
a 37 °C por 48 horas en ambiente
aeróbico.
Población bacteriana anaeróbica.
Se procedió igual que en el
procedimiento anterior, a excepción
de que las muestras fueron incubadas
en una jarra anaeróbica (sistema
GasPak) que logra la anaerobiosis al
introducir en el recipiente tabletas
generadoras de gas y cerrarlo
herméticamente, para incubarlos a
37 °C por 48 horas.
Población micótica anaeróbica
(levaduras). Se determinaron las
UFC de levaduras por gramo de
muestra mediante la siembra
en supercie para aislamiento
en agar dextrosa Sabouraud pH
5,6 (Merck
®
), suplementado con
penicilina y estreptomicina (1 mL de
suspensión de 6.000.000 UI, en cada
cápsula de Petri), y se incubaron a
37 °C por 72 horas en ambiente de
jarras anaeróbicas. No se consideró
la cuanticación de la población
micótica aeróbica debido a que es
muy compleja su determinación, ya
que son microorganismos de rápido
crecimiento y muy expansivo.
Clasificación bacteriana por
el método de tinción Gram.
Una vez obtenidos los cultivos
gas-generating tablets into the
container and sealing it, to incubate
them at 37 °C for 48 hours.
Anaerobic fungal population
(yeast). Yeast UFCs per gram of
sample were determined by surface
seeding on Sabouraud pH 5.6 dextrose
agar (Merck
®
), supplemented with
penicillin and streptomycin (1 mL
of suspension of 6.000.000 UI, in
each Petri capsule), and incubated
at 37 °C for 72 hours in anaerobic
jar environment. The quantication
of the aerobic fungal population
was not considered because their
determination is very complex,
since they are fast growing and very
expansive microorganisms.
Bacterial classification by the
Gram staining method. Once the
bacterial cultures were obtained,
Gram staining was performed for
each bacterial culture that presented
morphologically different colonies,
identifying the bacteria in Gram+
and Gram- and according to their
morphology (cocci and bacilli).
Determination of the Phytotoxicity.
For each sample, in ve times, the
germination index was determined
according to the method of Zucconi et al.
(1981) using lettuce seeds (Lactuca sativa
L.). In this test, 2 mL of aqueous extract
of the substrates (1:5) was added in a
Petri dish with lter paper containing
10 lettuce seeds. Subsequently, after
two days of incubation in the dark at 22
ºC, germination was stopped with the
addition of 1 mL of ethanol, the number
of germinated seeds and the root
length were determined. The control
was prepared using distilled water
(Acosta et al., 2004).
15
Esta publicación cientíca en formato digital es continuación de la Revista Impresa: Depósito legal pp 196802ZU42, ISSN 0378-7818.
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2021, 38: 06-30. Enero-Marzo.
Villalba et al. ISSN 2477-9407
bacterianos se procedió a realizar
la tinción Gram para cada cultivo
bacteriano que presentaba colonias
morfológicamente distintas,
identicando las bacterias en Gram+
y Gram- y de acuerdo a su morfología
(cocos y bacilos).
Determinación de la
Fitotoxicidad. Para cada muestra,
por quintuplicado, se determinó el
índice de germinación de acuerdo
al método de Zucconi et al. (1981)
usando semillas de lechuga (Lactuca
sativa L.). En este test, 2 mL de
extracto acuoso de los sustratos (1:5)
se agregó en una capsula de Petri
con papel de ltro contentiva de 10
semillas de lechuga. Posteriormente,
luego de dos días de incubación
en oscuridad a 22 ºC, se detuvo la
germinación con la adición de 1 mL
de etanol, se determinó el número de
semillas germinadas y la elongación
de las raíces. El control se preparó
utilizando agua destilada (Acosta et
al., 2004).
El índice de germinación (IG) se
calculó de la siguiente manera:
Índice de Germinación (IG) = x 100
nde: % GS = % de semillas
germinadas en el extracto de compost;
% G
agua
= % de semillas germinadas
en agua destilada; LMS = longitud
media de las semillas germinadas en
el extracto de compost (cm); LM
agua
= longitud media de las semillas
germinadas en agua destilada (cm).
Análisis estadístico. Con el
propósito de evaluar las diferencias
The germination index (GI) was
calculated as follows:
Germination index (IG) = x 100
Where: % GS =% of germinated
seeds in the compost extract; % Gagua
=% of seeds germinated in distilled
water; LMS = mean length of the
germinated seeds in the compost
extract (cm); LMagua = mean length
of the seeds germinated in distilled
water (cm).
Statistic analysis. In order to
evaluate the differences between the
values obtained for each parameter
studied (which were performed in
triplicate), the variability of the
data was measured through the
determination of the standard
deviation in the Excel spreadsheet
(Clifford and Taylor, 2008).
Results and discussion
Temperature. Temperature is one
of the main parameters for monitoring
the composting process, since its
evolution is related to many of the
biological reactions that take place
and is also associated with the ability
of the process to reduce the content
of pathogens (Stentiford, 1996).
Figure 1 shows the evolution of the
temperature during the composting
time of the two studied compost CC
and CJ, where it can be seen that the
maximum temperature reached in
both piles varied between 55 and 60
°C, a range that is considered optimal
(De Bertoldi et al., 1983; Avnimelech
et al., 2004; Insam and De Bertoldi,
16
Esta publicación cientíca en formato digital es continuación de la Revista Impresa: Depósito legal pp 196802ZU42, ISSN 0378-7818.
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2021, 38: 06-30. Enero-Marzo.
Villalba et al. ISSN 2477-9407
entre los valores obtenidos para cada
parámetro estudiado (los cuales se
realizaron por triplicado), se midió
la variabilidad de los datos a través
de la determinación de la desviación
estándar en la hoja de cálculo Excel
(Clifford y Taylor, 2008).
Resultados y discusión
Temperatura. La temperatura es
uno de los principales parámetros para
el monitoreo del proceso de compostaje,
ya que su evolución está relacionada
con muchas de las reacciones biológicas
que tienen lugar y además está
asociada a la capacidad del proceso
de reducir el contenido de patógenos
(Stentiford, 1996). En la gura 1 se
muestra la evolución de la temperatura
durante el tiempo de compostaje de los
dos compost estudiados CC y CJ, donde
se puede apreciar que la temperatura
máxima alcanzada en ambas pilas
varío entre 55 y 60 °C, rango que se
considera óptimo (De Bertoldi et al.,
1983; Avnimelech et al., 2004; Insam
y De Bertoldi, 2007; Kumar, 2010);
esta se alcanzó a partir del día 25 y se
mantuvo por 45 días más.
Figura 1. Variación de la temperatura (ºC) en los compost estudiados (CC= Compost
Comedor y CJ= Compost Jardín), durante el proceso de compostaje.
Figure 1. Variation of temperature (ºC) in the studied compost (CC = Compost Comedor
and CJ = Compost Jardín), during the composting process.
2007; Kumar, 2010); this was reached
from the 25th day and was maintained
for an additional 45 days.
Likewise, the different phases of
composting are observed: a mesophilic
phase, with a rapid increase in
temperature (25 to 40 °C) during the
rst 10 days (Figure 1), followed by a
thermophilic or hygienization phase
about 80 days approximately (up to
90 days from the start of the process).
In the thermophilic phase, pathogenic
mesophiles, fungi, spores, seeds and
undesirable biological elements are
eliminated (Golueke, 1982; Ghazifard
et al., 2001; Bernal et al., 2017), followed
by a second mesophilic phase, where
the temperature tends to decrease
and stabilize as a gradual decrease in
microbial activity occurs, and nally,
a maturation or humication phase
where the temperature of the compost
reaches that of the environment.
Figure 1 also shows the effect of
the turning on the temperature, when
observing that in the turning at 97
days after the temperature began to
decreased, it caused a further increase
in temperature, which indicates there
was still organic matter is easily
17
Esta publicación cientíca en formato digital es continuación de la Revista Impresa: Depósito legal pp 196802ZU42, ISSN 0378-7818.
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2021, 38: 06-30. Enero-Marzo.
Villalba et al. ISSN 2477-9407
Igualmente, se observan las
diferentes fases o etapas del
compostaje: una fase mesóla, con un
rápido incremento de la temperatura
(25 a 40 °C) durante los primeros 10
días (gura 1), seguida de una fase
termóla o de higienización de unos 80
días aproximadamente (hasta los 90
días de iniciado el proceso). En la fase
termóla se eliminan los mesólos
patógenos, hongos, esporas, semillas
y elementos biológicos indeseables
(Golueke, 1982; Ghazifard et al., 2001;
Bernal et al., 2017) seguidamente,
continúa una segunda fase mesóla,
en la cual la temperatura tiende a
disminuir y a estabilizarse ya que
ocurre una disminución gradual de
la actividad microbiana, y nalmente
tenemos una fase de maduración o
humicación donde la temperatura
del compost alcanza la del ambiente.
En la gura 1 también se nota el
efecto del volteo sobre la temperatura,
al observar que en el volteo a los
97 días cuando la temperatura
comenzaba a descender, el mismo
causó un incremento de nuevo en la
temperatura, lo cual nos indica que
aún quedaba materia orgánica de fácil
degradación o que le faltó humedad a
la pila; esto también explica la mayor
desviación estándar observada a los
60 y 97 días.
Cuantificación microbiana. Los
resultados de la sucesión de los
diferentes grupos microbianos en los
compost estudiados durante los seis
muestreos se presentan en la gura 2.
Al comparar el CC con el CJ (gura
2) se observó que al inicio del proceso la
densidad de población de las bacterias
aeróbicas fue similar para ambos, luego
degraded or and a moisture lack
moisture in the pile; this also explains
the higher standard deviation
observed at 60 and 97 days.
Microbial quantification. The
results of the succession of the
different microbial groups in the in
the studied compost during the six
samplings are presented in Figure 2.
When comparing CC with CJ (gure
2) it was observed that at the beginning
of the process the population density
of the aerobic bacteria was similar for
both, then in the thermophilic phase
the population density of the aerobic
bacteria increased in greater numbers
in the CJ, which decreased more than
in CC in the cooling phase. At 60 days
when the maximum temperatures
were reached in the thermophilic
phase, the densities were 2.7 x 10
12
CFU.g
-1
compost in CJ and 2.5 x 10
11
CFU.g
-1
compost in CC, values that
agree with those indicated by Insam
and De Bertoldi (2007).
This could be related to the fact that
CJ was elaborated using an inoculum
of a multienzyme mixture, and that
this was the cause of the differences
differences detected between the
two compost at the beginning of
the process; since in the case of CJ,
enzymes contributed to facilitating
the nutrition of microorganisms,
while in the case of CC, the native
microbial population of the starting
materials, it is presumed that it had
to develop its own mechanisms for
obtaining nutrients. However, the
microbial population at the end of the
evaluation reached the same density
(9.7 x 10
6
CFU.g
-1
compost) in both
compost.
18
Esta publicación cientíca en formato digital es continuación de la Revista Impresa: Depósito legal pp 196802ZU42, ISSN 0378-7818.
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2021, 38: 06-30. Enero-Marzo.
Villalba et al. ISSN 2477-9407
Figura 2. Resultados del contaje microbiano expresado como log (UFC.g
-1
de compost +
1) tanto de bacterias aerobias y anaerobias, así como de levaduras durante
el proceso de compostaje (150 días) para los compost estudiados (CC=
Compost Comedor y CJ= Compost Jardín).
Figure 2. Results of the microbial count expressed as log (CFU.g
-1
of compost + 1)
of both aerobic and anaerobic bacteria, as well as yeasts during the
composting process (150 days) for the compost studied (CC = Compost
Comedor and CJ = Compost Garden).
en la fase termóla se incrementó
en mayor número la densidad de la
población de las bacterias aeróbicas en
el CJ, las cuales decrecieron en mayor
cantidad que en el CC en la fase de
enfriamiento. A los 60 días cuando se
alcanzaron las máximas temperaturas
en la fase termóla, las densidades
fueron de 2,7 x 10
12
UFC.g
-1
compost en
CJ y 2,5 x 10
11
UFC.g
-1
compost en CC,
valores que concuerdan con los indicados
por Insam y De Bertoldi (2007).
Esto pudo estar relacionado con
el hecho de que el CJ fue elaborado
utilizando un inóculo de una mezcla
multienzimática, y que ésta fuese
la causa de las diferencias entre los
dos compost detectadas al inicio del
proceso; ya que para el caso del CJ,
las enzimas contribuyeron a facilitar
la nutrición de los microorganismos,
mientras que en el caso del CC, la
población microbiana nativa de los
materiales de partida, se presume
Anaerobic bacteria were found
during the rst three months in
higher population density in CC than
in CJ, but decreasing in both composts
gradually after the third month, there
was an increase in the population
density of anaerobic bacteria in CJ
compared to CC, to end of the
process at the end of the process,
similar values in their population
density and lower than the initial the
initial values were reached. These
results agree with Corlay et al. (1999),
Ryckeboer et al. (2003) and Gebeyehu
and Kibret (2013).
In the case of yeasts, in gure 2,
they were only observed in the rst
two samples (M0 and M1), decreasing
in both cases until they disappeared
(after the thermophilic stage began
in the second month). According to
Moreno and Moral (2008), the presence
of fungi and yeasts (unicellular
fungi) during composting is mainly
19
Esta publicación cientíca en formato digital es continuación de la Revista Impresa: Depósito legal pp 196802ZU42, ISSN 0378-7818.
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2021, 38: 06-30. Enero-Marzo.
Villalba et al. ISSN 2477-9407
que tuvo que desarrollar sus propios
mecanismos para la obtención de
nutrientes. Sin embargo, la población
microbiana al nal de la evaluación
alcanzó igual densidad (9,7 x 10
6
UFC.g
-1
compost) en ambos compost.
Las bacterias anaeróbicas se
encontraron durante los tres primeros
meses en mayor densidad poblacional
en el CC que en el CJ, disminuyendo
ambas paulatinamente; luego del
tercer mes hubo un incremento de
la densidad poblacional de bacterias
anaeróbicas en el CJ en comparación
con el CC, para posteriormente
alcanzar ambos compost al nal
del proceso valores similares en su
densidad poblacional e inferiores a
los valores iniciales. Estos resultados
coinciden con lo señalado por Corlay
et al. (1999), Ryckeboer et al. (2003) y
Gebeyehu y Kibret (2013).
En el caso de las levaduras, en
la gura 2, sólo se observaron en las
dos primeras muestras (M0 y M1)
disminuyendo en ambos casos hasta
desaparecer (luego de que se inicia
la etapa termóla en el segundo
mes). Según Moreno y Moral (2008),
la presencia de hongos y levaduras
(hongos unicelulares) durante
el compostaje está condicionada
principalmente por la temperatura;
es así que para los CC y CJ, estas
temperaturas pudieron tener un
efecto antimicótico, ya que no se
observaron levaduras luego de este
período.
También se debe tomar en cuenta,
que cuando el oxígeno está presente,
las levaduras crecen ecientemente
formando, a partir de los azúcares,
biomasa y CO
2
(Madigan et al., 1997),
conditioned by temperature; thus, for
CC and CJ, these temperatures could
have an antifungal effect, since no
yeasts were observed after this period.
It should also be taken into
account that when oxygen is present,
yeasts grow efciently, forming from
sugars, biomass and CO
2
(Madigan
et al., 1997), and the disappearance
of yeasts may be related to the fact
that the sugar contents have been
degraded and depleted. This study
had the limitation that the
aerobic fungi were studied, in
which case it is probable that yeasts
were found in the nal stages of the
composting process. It is interesting to
note that under anaerobic conditions,
the yeasts decreased and disappeared
during the thermophilic stage.
As we can see in gure 2, the
highest population density occurred
in the thermophilic phase of the
composting process; at this stage
there was greater metabolic activity,
due to the abundance and availability
of a substrate with easily assimilable
nutrients. This coincided and is
explained as indicated by Paul (2015),
Escobar et al. (2012) and Insam and
De Bertoldi (2007), since composting
is mainly a microbiological process
characterized by the interaction
and succession of various groups of
microorganisms, whose role in the
biooxidation process is essential, and
in which the simple compounds
of carbon (such as amino acids,
soluble sugars, organic acids, among
others) are easily metabolized and
mineralized by a heterogeneous and
heterotrophic microora, thus high
metabolic activity and exothermic
20
Esta publicación cientíca en formato digital es continuación de la Revista Impresa: Depósito legal pp 196802ZU42, ISSN 0378-7818.
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2021, 38: 06-30. Enero-Marzo.
Villalba et al. ISSN 2477-9407
y la desaparición de las levaduras
puede estar relacionada con el hecho
de que los contenidos de azúcares
hayan sido degradados y agotados.
Este estudio tuvo la limitación de no
estudiar los hongos aerobios, en cuyo
caso es probable que se encontrasen
levaduras en las etapas nales del
proceso de compostaje, lo que sí
es interesante señalar es que, en
condiciones anaerobias, las levaduras
disminuyeron y desaparecieron
durante la etapa termóla.
Como podemos observar en
la gura 2, la mayor densidad
poblacional ocurrió en la fase
termóla del proceso de compostaje;
en esta etapa hubo mayor actividad
metabólica, debido a la abundancia y
a la disponibilidad de un sustrato con
nutrientes fácilmente asimilables.
Esto coincidió y se explica según lo
señalado por Paul (2015), Escobar
et al. (2012) e Insam y De Bertoldi
(2007), ya que el compostaje
es principalmente un proceso
microbiológico caracterizado por la
interacción y sucesión de varios grupos
de microorganismos, cuyo rol en el
proceso de biooxidación es esencial, y
en el cual los compuestos de carbono
simples (como aminoácidos, azúcares
solubles, ácidos orgánicos, entre
otros) son fácilmente metabolizados
y mineralizados por una microora
heterotróca y heterogénea, así
una alta actividad metabólica y
procesos exotérmicos incrementan la
temperatura en la masa de compost,
lo que representa un fuerte efecto
selectivo a favor de pocos organismos
aerobios termólos y productores de
esporas.
processes increase the temperature in
the compost mass, which represents a
strong effect, selective in favor of few
aerobic thermophilic organisms and
spore producers.
In gure 2, a decrease in
the population density of the
microorganisms present in both
compost (biological stabilization) was
clearly observed at the end of the
composting process. This nal stage
began from the third month and was
the beginning of a mesophilic (cooling)
stage in which the compost reached
its biological stability, a stage of
approximately two months duration.
In the last stage, in the maturation
phase (from the fth and last month
of sampling), the activity and the
number of the microorganisms
decreased due to the characteristics
of the substrate present at that
time (poor or scarce in degradable
organic compounds), and began its
humication process (incipient),
which coincides with that indicated
by Bernal et al. (2017), Moreno and
Moral (2008), Lombao et al. (2012)
and Tiquia (2005), who pointed out
that the microbial biomass decreases
towards the end of the composting, as
the product reaches its maturation,
due to the gradual degradation of
the most labile molecules, making
the total count of microorganisms
throughout the process a good test of
the state of maturity of the compost.
Bacterial classication by Gram
staining. By performing a Gram
stain on each bacterial culture that
presented morphologically different
colonies, the bacterial populations
could be grouped based on their
21
Esta publicación cientíca en formato digital es continuación de la Revista Impresa: Depósito legal pp 196802ZU42, ISSN 0378-7818.
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2021, 38: 06-30. Enero-Marzo.
Villalba et al. ISSN 2477-9407
En la gura 2 se observó
claramente al nal del proceso
de compostaje una disminución
en la densidad poblacional de los
microorganismos presentes en ambos
compost (estabilización biológica).
Esta etapa nal se inició a partir del
tercer mes y fue el inicio de una etapa
mesóla (de enfriamiento) en la cual
el compost alcanzó su estabilidad
biológica, etapa de unos dos meses de
duración aproximadamente.
En la última etapa, en la fase de
maduración (a partir del quinto y
último mes de muestreo), la actividad
y el número de los microorganismos
disminuyó debido a las características
del sustrato presente en ese momento
(pobre o escaso en compuestos
orgánicos degradables), e inició su
proceso de humicación (incipiente),
lo cual coincide con lo señalado
por Bernal et al. (2017), Moreno y
Moral (2008), Lombao et al. (2012) y
Tiquia (2005), quienes señalan que
la biomasa microbiana decrece hacia
el nal del compostaje, a medida que
el producto alcanza su maduración,
debido a la degradación paulatina de
las moléculas más lábiles, por lo que
el recuento total de microorganismos
a lo largo del proceso puede constituir
un buen test del estado de maduración
del compost.
Clasificación bacteriana por tinción
Gram. Al realizarle una tinción Gram a
cada cultivo bacteriano que presentaba
colonias morfológicamente distintas,
se pudieron agrupar las poblaciones
bacterianas con base en su morfología
(cocos y bacilos) en Gram positivas y
Gram negativas, estos resultados se
aprecian en las guras 3 y 4.
morphology (cocci and bacilli) in Gram
positives and Gram negatives, these
results are seen in Figures 3 and 4.
In these gures, the succession in
the bacterial populations present in
the compost during the composting
process can be observed, with Gram-
and Gram+ bacteria predominating
at the end of it (their cell walls are
more resistant to stress situations,
Madigan et al., 1997). These results
coincide with that reported by García-
Izquierdo and Polo (1999), Moreno and
Moral (2008) and Pérez et al. (2010),
who pointed out that the evolution
of temperature with the composting
process greatly conditions microbial
populations: it increases spores and
Gram+ bacteria, conversely inhibiting
many other types of bacteria at 55 °C.
Strom (1985), Klamer and
Bååth (1998), Boulter et al. (2000),
Ghazifard et al. (2001), Rebollido et
al. (2008), Moreno and Moral (2008)
and Paul (2015) pointed out that,
in the analysis of the composting
process, the thermophilic community
that develops above 50 °C consists
of Gram+ bacteria (such as those
obtained in the compost studied)
mostly from the Bacillus genus, a
genus well known as dominant in high
temperature compost. On the other
hand, Puente et al. (2009), mentions
the genus Bacillus as microorganisms
that promote plant growth and acts
as biocontrollers.
In Figures 3 and 4, it can be
observed that between month 2 (M2)
and month 3 (M3) -thermophilic
phase- the presence of Gram+ aerobic
bacilli, a group to which actinobacteria
belong (Steger et al., 2005, 2007) and
22
Esta publicación cientíca en formato digital es continuación de la Revista Impresa: Depósito legal pp 196802ZU42, ISSN 0378-7818.
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2021, 38: 06-30. Enero-Marzo.
Villalba et al. ISSN 2477-9407
Figura 3. Tipos y cantidades de bacterias de acuerdo a su morfología (cocos y bacilos)
y tinción Gram (+ y -), encontradas durante el proceso de elaboración de
Compost Comedor (CC).
Figure 3. Types and amounts of bacteria according to their morphology (cocci and
bacilli) and Gram staining (+ and -), found during the Compost Comedor
(CC) elaboration process.
Figura 4. Tipos y cantidades de bacterias de acuerdo a morfología (cocos y bacilos)
y tinción Gram (+ y -), encontradas durante el proceso de elaboración de
Compost Jardín (CJ).
Figure 4. Types and quantities of bacteria according to morphology (cocci and bacilli)
and Gram staining (+ and -), found during the Compost Garden (CJ)
elaboration process.
23
Esta publicación cientíca en formato digital es continuación de la Revista Impresa: Depósito legal pp 196802ZU42, ISSN 0378-7818.
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2021, 38: 06-30. Enero-Marzo.
Villalba et al. ISSN 2477-9407
En dichas guras se pueden
observarla sucesión en las poblaciones
bacterianas presentes en los compost
durante el proceso de compostaje,
predominando al inicio bacterias
Gram- y Gram+ al nal del mismo (sus
paredes celulares son más resistentes
a las situaciones de estrés, Madigan et
al., 1997). Estos resultados coinciden
con lo reportado por García-Izquierdo
y Polo (1999), Moreno y Moral (2008) y
Pérez et al. (2010), quienes señalaron
que la evolución de la temperatura con
el proceso de compostaje condiciona
enormemente a las poblaciones
microbianas: incrementa las esporas
y las bacterias Gram+, inhibiendo por
el contrario a otros muchos tipos de
bacterias a los 55 °C.
Strom (1985), Klamer y Bååth
(1998), Boulter et al. (2000), Ghazifard
et al. (2001), Rebollido et al. (2008),
Moreno y Moral (2008) y Paul (2015)
señalaron que, en el análisis del
proceso de compostaje, la comunidad
termóla que se desarrolla sobre los
50°C consiste de bacterias Gram+
(como las obtenidas en los compost
estudiados) en su mayoría del género
Bacillus, un género bien conocido
como dominante en compost a altas
temperaturas. Por otra parte, Puente
et al. (2009), menciona al género
Bacillus como microorganismos
promotores del crecimiento vegetal y
como biocontroladores.
En las guras 3 y 4, se puede
observar entre el mes 2 (M2) y el mes
3 (M3) -fase termóla-, la presencia
de bacilos aerobios Gram+, grupo al
cual pertenecen las actinobacterias
(Steger et al., 2005, 2007) y período
en el cual las temperaturas en ambos
the period in which the temperatures
in both compost (dining room and
garden) were above 50 °C, coinciding
with that indicated by Paul (2015) and
Cervera et al. (2012). Actinobacteria
have also been described as colonizers
of the rhizosphere, capable of exerting
biocontrol on phytopathogenic
fungi, promoting nodulation and
assisting Rhizobium bacteriodes,
iron assimilation, nitrogen xation in
legumes, which indirectly contributes
to stimulating plant growth (Escobar
et al., 2012; Cervera et al., 2012; van
Elsas and Postma, 2007).
During the composting process,
the presence of white spots inside
the composting piles was observed
after the rst month; this coincides
with Menoyo (1995), who in a study
on composting reported the visual
appreciation of white spots possibly
corresponding to fungal colonies,
which generally began to appear
during the thermophilic phase. On
the other hand, Boulter et al. (2000)
pointed out that actinobacteria can
be seen as a white lm on the surface
of organic matter, at the end of the
composting process.
We must also consider the possible
appearance of Gram negative bacilli
during the cooling phase, where
Pseudomonas are found, reported by
Pérez et al. (2015) as opportunistic
pathogens in crops of economic
importance such as tomato (Solanum
lycopersicum L.) in Saudi Arabia
and broccoli (Brassica oleracea L.) in
China; which can represent a serious
risk to the sanitary quality of the nal
product destined for agronomic use
(Hassen et al., 2001).
24
Esta publicación cientíca en formato digital es continuación de la Revista Impresa: Depósito legal pp 196802ZU42, ISSN 0378-7818.
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2021, 38: 06-30. Enero-Marzo.
Villalba et al. ISSN 2477-9407
compost (comedor y jardín) estuvieron
por encima de 50°C, coincidiendo con
lo señalado por Paul (2015) y Cervera
et al. (2012). Las actinobacterias,
también han sido descritas como
colonizadoras de la rizósfera,
capaces de ejercer biocontrol, sobre
hongos topatógenos, promover la
nodulación y ayudar a los bacteriodes
de Rhizobium, a la asimilación del
hierro, en la jación de nitrógeno,
en leguminosas, lo cual contribuye,
indirectamente, a estimular el
crecimiento vegetal (Escobar et al.,
2012; Cervera et al., 2012; van Elsas y
Postma, 2007).
Durante el proceso de compostaje,
se apreció luego del primer mes la
presencia de manchas blancas en el
interior de las pilas de compostaje;
esto coincide con Menoyo (1995),
quien en un estudio sobre compostaje
reportó la apreciación visual de
manchas blancas correspondientes
posiblemente a colonias de hongos,
las cuales generalmente comenzaban
a aparecer durante la fase termóla.
Por otra parte, Boulter et al. (2000)
señalaron que las actinobacterias
pueden ser vistas como una película
blanca en la supercie de la materia
orgánica, al nal del proceso de
compostaje.
También hay que considerar
la posible aparición de bacilos
Gram negativos durante la fase de
enfriamiento, donde se encuentran las
Pseudomonas, reportadas por Pérez et
al. (2015) como patógenos oportunistas
en cultivos de importancia económica
como el tomate (Solanum lycopersicum
L.) en Arabia Saudita y el brócoli
(Brassica oleracea L.) en China; lo que
However, Pérez et al. (2015)
also refer to this bacterial genus
(Pseudomonas) as an excellent
example of the combination of multiple
mechanisms through which it exerts
effective biological control, including
direct antagonism and induction of
resistance in the plant.
Phytotoxicity determination.
Figure 5 shows the in vitro
phytotoxicity test, which combines
germination and elongation of
the root of lettuce seeds (Lactuca
sativa); it constitutes a valuable
tool to evaluate the composting
process in the different phases
(decomposition, stabilization and
curing) and is expressed as a
germination index (in percentage
units; % IG).
Figure 5 shows that the dining
room and garden compost were
free of phytotoxic substances
after 50 days of the composting
process, coinciding with Zucconi
et al. (1981), Alburquerque et al.
(2006), Riffaldi et al. (1986) and
Gao et al. (2010), regarding that
phytotoxicity during composting,
seem to be strictly associated with
the initial decomposition stage
where toxic concentrations of
ammonia, soluble salts and short-
chain organic substances such
as acetic, propionic, butyric and
valeric acids are produced. These
authors observed a rapid growth
of the germination index after
40 days and stabilizes at the end
of the composting period. Other
authors such as Tiquia (2010)
and Gómez-Brandón et al. (2007)
indicate that ammonium ion and
25
Esta publicación cientíca en formato digital es continuación de la Revista Impresa: Depósito legal pp 196802ZU42, ISSN 0378-7818.
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2021, 38: 06-30. Enero-Marzo.
Villalba et al. ISSN 2477-9407
puede representar un grave riesgo
para la calidad sanitaria del producto
nal destinado a la reutilización
agronómica (Hassen et al., 2001).
Sin embargo, Pérez et al. (2015)
también hacen referencia a que este
género bacteriano (Pseudomonas)
constituye un excelente ejemplo
de la combinación de múltiples
mecanismos a través de los cuales
ejerce un efectivo control biológico,
incluyendo el antagonismo directo
y la inducción de resistencia en la
planta.
Determinación de Fitotoxicidad.
En la gura 5 se muestra el test in
vitro de totoxicidad, el cual combina
la germinación y la elongación de la
raíz de semillas de lechuga (Lactuca
sativa); constituye una herramienta
Figura 5. Índice de Germinación (IG) para los compost estudiados (Comedor y Jardín)
durante el proceso de compostaje (150 días).
Figure 5. Germination Index (GI) for the studied compost (Canteen and Garden)
during the composting process (150 days).
certain soluble heavy metals such
as zinc and copper have a negative
impact on seed germination when
composting pig and beef manure,
respectively. Furthermore, these
authors suggest composting times
greater than 130 days.
According to what was outlined
by Zucconi et al. (1981) and
Thompson et al. (2001) our compost
could be considered as mature
since the germination index (GI)
80 % at the end of the process.
Conclusions
Temperature is a good indicator
of the evolution of composting
process, being closely associated
with biological activity indicating
26
Esta publicación cientíca en formato digital es continuación de la Revista Impresa: Depósito legal pp 196802ZU42, ISSN 0378-7818.
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2021, 38: 06-30. Enero-Marzo.
Villalba et al. ISSN 2477-9407
valiosa para evaluar el proceso de
compostaje en las diferentes fases
(descomposición, estabilización y
curado) y se expresa como índice
de germinación (en unidades de
porcentaje; % IG).
En la gura 5 se aprecia que
los compost de comedor y jardín
estuvieron libres de sustancias
totóxicas a partir de los 50 días del
proceso de compostaje, coincidiendo
con lo citado por Zucconi et al. (1981),
Alburquerque et al. (2006), Riffaldi
et al. (1986) y Gao et al. (2010), en
lo relacionado a que evaluaciones de
totoxicidad durante el compostaje,
parecen estar estrictamente asociadas
a la etapa inicial de descomposición
donde se producen concentraciones
tóxicas de amonio, sales solubles y
sustancias orgánicas de cadena corta
como los ácidos acético, propiónico,
butírico y valérico. Estos autores
observaron un rápido crecimiento
del índice de germinación después de
los 40 días y se estabiliza al nal del
período de compostaje. Otros autores
como Tiquia (2010) y Gómez-Brandón
et al. (2007) indican que el ión amonio
y ciertos metales pesados solubles
como zinc y cobre tienen un impacto
negativo sobre la germinación de las
semillas al compostar estiércol de
cochino y vacuno, respectivamente.
Además, estos autores sugieren
tiempos de compostaje mayores de
130 días.
De acuerdo a lo reseñado por
Zucconi et al. (1981) y Thompson et al.
(2001) nuestros compost se podrían
considerar como maduros ya que el
índice de germinación (IG) 80 % al
nal del proceso.
the stages of the process: mesophilic,
thermophilic, mesophilic and cooling.
This condition allows dening
the characteristics of the compost
microorganisms, as well as the
stability and maturity once the
compost reaches room temperature
at the end of the process.
The microbial count allowed
evaluating the stability of the
compost, since by decreasing the CFU
amount at nal stage of the process,
it was shown that it was biologically
stabilized.
The bacterial classication by
Gram staining is a good indicator
of the successions that occur in the
composting process and useful to help
the classication of microorganisms
present.
The phytotoxicity test corroborated
that the studied compost reached
a level of maturity and stability,
important conditions for determining
the quality of a compost.
Acknowledgment
The authors express their gratitude
to the Laboratorio de Ecología de
Suelos del Instituto Venezolano de
Investigaciones Cientícas (IVIC),
the Nursery El Horticultor, and to
Universidad Simón Bolívar (USB).
End of English Version
Conclusiones
La temperatura representó un
buen indicador de la evolución del
proceso de compostaje, al estar
27
Esta publicación cientíca en formato digital es continuación de la Revista Impresa: Depósito legal pp 196802ZU42, ISSN 0378-7818.
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2021, 38: 06-30. Enero-Marzo.
Villalba et al. ISSN 2477-9407
íntimamente asociado con la actividad
biológica indicando las etapas del
proceso: mesóla, termóla, mesóla
y de enfriamiento. Esta condición
permite denir las características
de los microorganismos del compost,
así como la estabilidad y la madurez
una vez que el compost alcanzó la
temperatura ambiente al nal del
proceso.
El contaje microbiano permitió
evaluar la estabilidad del compost,
ya que al disminuir la cantidad de
UFC en la etapa nal del proceso se
demostró que estaba biológicamente
estabilizado.
La clasicación bacteriana por
tinción Gram, resultó ser un buen
indicador de las sucesiones que
ocurren en el proceso de compostaje y
útil para ayudar a la clasicación de
los microorganismos presentes.
El test de totoxicidad permitió
corroborar que los compost estudiados
alcanzaron un nivel de madurez y
estabilidad, condiciones importantes
para la determinación de la calidad de
un compost.
Agradecimientos
Los autores expresan su
agradecimiento al Laboratorio de
Ecología de Suelos del Instituto
Venezolano de Investigaciones
Cientícas (IVIC), al Vivero El
Horticultor, y a la Universidad Simón
Bolívar (USB).
Literatura citada
Acosta, Y.; J. Paolini y E. Benitez. 2004.
Índice de humicación y prueba de
toxicidad de residuos orgánicos de uso
agrícola potencial. Rev. Fac. Agron.
(LUZ). 21:385-397.
Alburquerque, J. A.; J. Gonzálvez; D. García
and J. Cegarra. 2006. Measuring
detoxication and maturity in
compost made from ‘‘alperujo’’, the
solid by-product of extracting olive
oil by the two-phase centrifugation
system. Chemosphere. 64(3): 470-476.
Available in: https://doi.org/10.1016/j.
chemosphere.2005.10.055.
Avnimelech, Y.; R. Eilat; Y. Porat and P. A.
Kottas. 2004. Factors affecting the
rate of windrow composting in eld
studies. Compost Sci. Util. 12(2):114–
118. Available in: https://doi.org/10.10
80/1065657x.2004.10702169
Bernal, M. P.; S. Sommer; D. Chadwick; C.
Qing; L. Guoxue and F. C. Michel Jr.
2017. Current approaches and future
trends in compost quality criteria
for agronomic, environmental,
and human health benets. Adv.
Agron. 144: 143-233. Available
in: http://dx.doi.org/10.1016/
bs.agron.2017.03.002
Boulter, J.; G. Boland and J. Trevors. 2000.
Compost: A study of the development
process and endproduct potential
for supression of turfgrass disease.
World J. Microbiol. Biotechnol.
16(2):115-134. Available in: https://
doi.org/10.1023/a:1008901420646.
Cervera, O.; M. Vargas; F. Suárez; M. López;
J. López; M. Jurado y J. Moreno.
2012. Evolución de las poblaciones
microbianas en el compostaje:
Actinobacterias. p. 313-325. En:
Barral, M., M. Díaz-Raviña, R.
Devesa-Rey y R. Paradelo, R. (Eds.).
Avances en la investigación sobre
compost. Materias primas, procesos,
calidad y usos. III Jornadas de la
Red Española de Compostaje (REC).
Andavira Editora, S. L. Santiago de
Compostela, España.
Ceustermans, A.; J. Coosemansand and J.
Ryckeboer. 2010. Compost microbial
activity related to compost stability.
p. 115-134. En: H. Insam, I. Franke-
Whittle and M. Goberna (Eds.)
Microbes at work. Springer Verlag,
28
Esta publicación cientíca en formato digital es continuación de la Revista Impresa: Depósito legal pp 196802ZU42, ISSN 0378-7818.
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2021, 38: 06-30. Enero-Marzo.
Villalba et al. ISSN 2477-9407
Berlin. Available in: https://doi.
org/10.1007/978-3-642-04043-6_6.
Clifford, R. y R. Taylor. 2008. Bioestadística.
Ediciones Pearson Educación. Ciudad
de México, México. 538 p.
Cooperband, L. R.; A. G. Stone; M. R.
Frydaand and J. L. Ravel. 2003.
Relating compost measures of
stability and maturity to plant
growth. Compost Sci. Util. 11(2):113-
124. Available in: https://doi.org/10.10
80/1065657x.2003.10702118.
Corlay, L; R. Ferrera-Cerrato; J. Etchevers;
A. Echegaray y J. Santizo. 1999.
Cinética de grupos microbianos en el
proceso de producción de composta y
vermicomposta. Agrociencia (México),
33(4): 375-380.
De Bertoldi, M.; G. Valliniand and A. Pera.
1983. The biology of composting:
a review. Waste Manage. Res. 1:
157-176. Available in: https://doi.
org/10.1016/0734-242x(83)90055-1
Departamento de Agricultura de la DGA
(Diputación General de Aragón).
2001. Producción y gestión del
compost. Segunda Edición. En:
Informaciones Técnicas 88.
Dirección General de Tecnología
Agraria. Servicio de Formación
y Extensión Agraria. Centro de
Técnicas Agrarias. Departamento
de Agricultura. Gobierno de Aragón.
Zaragoza, España. 32 p. Available
in: http://bibliotecavirtual.aragon.es/
bva/i18n/catalogo_imagenes/grupo.
cmd?path=3705249.
Escobar, N.; J. Mora y N. Romero. 2012.
Identicación de poblaciones
microbianas en compost de residuos
orgánicos de ncas cafeteras de
Cundinamarca. Boletín Cientíco.
Centro de Museos. Museo de Historia
Natural. Universidad de Caldas,
Manizales (Colombia) 16(1): 75-88.
Gao, M.; F. Liang; A. Yu; B. Li and L.
Yang. 2010. Evaluation of stability
and maturity during forced-
aeration composting of chicken
manure and sawdust at different
C/N ratios. Chemosphere. 78(5):
614–619.
Available in: doi:10.1016/j.
chemosphere.2009.10.056
García, D.; L. Lima; L. Ruíz y P. Calderón.
2014. Métodos y parámetros para
determinar la madurez en el compost
a nivel de ncas. Cub@: Medio
Ambiente y Desarrollo. Revista
electrónica de la Agencia de Medio
Ambiente. Año 14. Nº 26. 11 p.
García-Izquierdo, C. y A. Polo. 1999. Estudio
de parámetros bioquímicos en
procesos de estabilización de residuos
orgánicos urbanos. Residuos 51:76-
81.
Gebeyehu, R. and M. Kibret. 2013.
Microbiological and physico-chemical
analysis of compost and its effect on
the yield of kale (Brassica oleracea) in
Bahir Dar, Ethiopia. EJST. 6(2): 93-
102.
Ghazifard, A.; R. Kasra-Kermanshahiand
and Z. Far. 2001. Identication of
thermophilic and mesophilic bacteria
and fungi in Esfahan (Iran) municipal
solid waste compost. Waste Manage.
Res. 19(3): 257–261.
Available in:
doi:10.1177/0734242x0101900307.
Golueke, C. G. 1982. When is compost “safe”?
Biocycle. 23(2): 28-38.
Gómez-Brandon, M.; C. Lazcano and J.
Domínguez. 2007. The evaluation
of stability and maturity during
the composting of cattle manure.
Chemosphere. 70(3): 436–444.
Available in: https://doi.org/10.1016/j.
chemosphere.2007.06.065.
Hassen, A.; K. Belguith; N. Jedidi; A. Cherif;
M. Cherifand and A. Boudabous.
2001. Microbial characterization
during composting of municipal solid
waste. Bioresour. Technol. 80(3):
217-225. Available in: https://doi.
org/10.1016/s0960-8524(01)00065-7
Insam, H. and M. De Bertoldi. 2007.
Microbiology of composting process.
P. 25-48. En: L.F. Diaz, M. De
Bertoldi, W. Bidlingmaier y E.
Stentiford (Eds.). Compost Science
and Technology. Waste Management.
Series, Nº 8. Amsterdam, The
Netherlands. Available in: https://doi.
org/10.1016/s1478-7482(07)80006-6.
Klamer, M. and E. Bååth. 1998. Microbial
community dynamics during
29
Esta publicación cientíca en formato digital es continuación de la Revista Impresa: Depósito legal pp 196802ZU42, ISSN 0378-7818.
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2021, 38: 06-30. Enero-Marzo.
Villalba et al. ISSN 2477-9407
composting of straw material studied
using phospholipid fatty acid analysis.
FEMS Microbiol. Ecol. 27(1): 9-20.
Available in: https://doi.org/10.1016/
s0168-6496(98)00051-8.
Kumar, S. 2010. Composting of municipal
solid waste. Crit. Rev. Biotechnol.
31(2): 112–136.
Available in: doi:10.
3109/07388551.2010.492207.
Lombao, A.; A. Barreiro; M. Fernández-
Gómez; E. Romero; R. Nogales y M.
Díaz-Raviña. 2012. Caracterización
de la comunidad microbiana de
diversos suelos y residuos no
compostados y vermicompostados.
p. 303-312. En: Barral, M., M. Díaz-
Raviña, R. Devesa-Rey y R. Paradelo
(Eds.). Avances en la investigación
sobre compost. Materias primas,
procesos, calidad y usos. III Jornadas
de la Red Española de Compostaje
(REC). Andavira Editora, S. L.
Santiago de Compostela, España.
Madigan, M. T.; J. M. Martinko y J.
Parker. 1997. Brock. Biología de los
microorganismos. Octava edición.
Editorial Prentice Hall. Madrid,
España. 986 p.
Manual de Laboratorio de Microbiología
Ambiental BC-6384. 1999.
Departamento de Biología Celular.
División de Ciencias Biológicas.
Universidad Simón Bolívar.
Coordinadores de la edición: Rocha,
C., C. Sajo, M. Rodríguez y J.
Gonçalves. Mimeograado. 76 p.
Menoyo, A. 1995. Valorización agronómica
de la gallinaza. Compostaje. Tesis
Doctoral. Universidad del País
Vasco. Facultad de Ciencias (Sección
Químicas), Departamento de
Química Analítica. Bilbao. 325 p.
Moreno, J. y R. Moral. 2008. Compostaje,
Bloque 1. Tratamiento y gestión de
los residuos orgánicos. Ediciones
Mundi-Prensa. Madrid, España.
Partanen, P.; J. Hultman; L. Paulin; P.
Auvinen and M. Romanschuk. 2010.
Bacterial diversity at different
stages of the composting processes.
BMC Microbiol. 10:94. Available in:
https://doi.org/10.1186/1471-2180-
10-94.
Paul, E. 2015. Soil microbiology, ecology
and biochemistry. Fourth Edition.
Academic Press. London, UK. 582 p.
Pérez, R.; A. Pérez y M. Vertel. 2010.
Caracterización nutricional,
sicoquímica y microbiológica de
tres abonos orgánicos para uso de
agroecosistemas de pasturas en la
subregión sabanas del departamento
de Sucre. Colombia. Revista
Tumbaga. 5(1):27-37.
Pérez, S.; O. Coto; M. Echemendía y G.
Ávila. 2015. Pseudomonas uorescens
Migula, ¿control biológico o patógeno?.
Rev. Protección Veg.
30(3): 225-234.
Puente, M.; J. García; E. Rubio y A. Perticari.
2009. Microorganismos promotores
del crecimiento vegetal empleados
como inoculantes en trigo. Revista
Horizonte A. Magazine de las Ciencias
Agrarias. 6(23):14-17.
Rebollido, R.; J. Martínez; Y. Aguilera; K.
Melchor; I. Koerner and R. Stegmann.
2008. Microbial populations during
composting process of organic
fraction of municipal solid waste.
Appl. Ecol. Environ. Res. 6(3): 61-67.
Available in: https://doi.org/ 10.15666/
aeer/0603_061067.
Richard, T. and N. Trautmann. 2002. C/N
Ratio. Available in: http://www.cfe.
cornell.edu/compost /calc/cn_ratio.
html. Consultation date: el 08 de
mayo de 2002.Riffaldi, R.; R. Levi-
Minzi; A.
Pera and M. De Bertoldi. 1986. Evaluation of
compost maturity by means of chemical
and microbial analyses. Waste
Manage. Res. 4(1): 387-396.
Available
in: doi:10.1177/0734242x8600400157
Rivero, C. 1999. Materia orgánica del suelo.
Revista Facultad de Agronomía
(Maracay). Alcance 57:212 p.
Román, P.; M. Martínez y A. Pantoja.
2013. Manual de Compostaje del
Agricultor, Experiencias en América
Latina. Organización de las Naciones
Unidas para la Alimentación y la
Agricultura (FAO), Ocina Regional
para América Latina y el Caribe.
Santiago de Chile, Chile. 112
p.Ryckeboer, J.; J. Merga ert; J.
30
Esta publicación cientíca en formato digital es continuación de la Revista Impresa: Depósito legal pp 196802ZU42, ISSN 0378-7818.
Rev. Fac. Agron. (LUZ). 2021, 38: 06-30. Enero-Marzo.
Villalba et al. ISSN 2477-9407
Coosemans; K. Deprintsand and J.
Swings. 2003. Microbiological aspects
of biowaste during composting in
a monitored compost bin. J. Appl.
Microbiol. 94(1): 127-137. Available
in: https://doi.org/10.1046/j.1365-
2672.2003.01800.x.
Satoshi, F. 2013. Resíduos orgânicos e solos.
Formulaçâo, índices de maduraçâo
de substratos e compostos orgânicos
voláteis alvos. Tese Doutorado
apresentada à Universidade
Federal de Lavras, Programa Post-
Graduaçao em Ciencia do Solo.
Minas Gerais. Brasil. 146 p.
Steger, K.; A. Jarvis; T. Vasara; M.
Romantschuk and I. Sundh. 2007.
Effects of different temperature
management on development of
Actinobacteria populations during
composting. Res. Microbiol. 158(7):
617-624. Available in: https://doi.
org/10.1016/j.resmic.2007.05.006.
Steger, K.; Y. Eklind; J. Olsson and I.
Sundh. 2005. Microbial community
growth and utilization of carbon
constituents during thermophilic
composting at different oxygen
levels. Microb. Ecol. 50(2): 163-171.
Available in: https://doi.org/10.1007/
s00248-004-0139-y
Stentiford, E. I. 1996. Composting control:
principles and practice. p. 49-59. En:
M. De Bertoldi, P. Sequi, B. Lemmes
y T. Papi (Eds.), The Science of
Composting. Part I. Chapman and
Hall, London, UK.
Strom, P. F. 1985. Identication of
thermophilic bacteria in solid-waste
composting. Appl. Environ. Microbiol.
50(4): 906-913.
Thompson, W.; P. Leege; P. Millner and
M. Watson. 2001. Test Methods
for the Examination of Compostig
and Compost (TMECC). Prepared
for: the U.S. Composting Council
Research and Education Foundation
(USCCREF) and U.S. Department of
Agriculture (USDA).
Tiquia, S. M. 2010. Reduction of compost
phytotoxicity during the process of
decomposition. Chemosphere 79: 506-
512. Available in: https://doi:10.1016/j.
chemosphere.2010.02.040.
Tiquia, S. M. 2005. Microbiological parameters
as indicators of compost maturity.
J. Appl. Microbiol. 99: 816-828.
Available in: https://doi.org/10.1111/
j.1365-2672.2005.02673.x.
Trautmann, N. and M. Krasny. 1998.
Composting in the classroom:
Scientic Inquiry for High School
Students. Kendall/ Hunt Publishing
Company, Dubuque, Iowa, USA. 116
p.
van Elsas, J. D. and J. Postma. 2007.
Suppression of soil-borne
phytopathogens by compost. p. 201-
214. En: L.F. Diaz, M. De Bertoldi, W.
Bidlingmaier y E. Stentiford (Eds.)
Compost Science and Technology.
Waste Management Series, 8.
Amsterdam, The Netherlands.
Zucconi, F.; A. Pera; M. Forte and M. De
Bertoldi. 1981. Evaluating toxicity of
immature compost. BioCycle. 22:54-
57.